Полное собрание законодательства СССР
Система доступа к базе всех нормативно-правовых актов Союза Советских Социалистицеских Республик.
www.ussrdoc.com

 





Сборники документов по хронологии с 1917г по 1992г
| Сборник 1 | Сборник 2 | Сборник 3 | Сборник 4 | Сборник 5 | Сборник 6 | Сборник 7 | Сборник 8 | Сборник 9 | Сборник 10 |



 

Утверждены

Министерством здравоохранения СССР

29 июля 1991 г. N 6093-91

 

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПИРЕТРОИДОВ (ПЕРМЕТРИНА, ЦИПЕРМЕТРИНА,

ФЕНВАЛЕРАТА И ДЕКАМЕТРИНА) В МОЛОКЕ И МЯСЕ ЖИВОТНЫХ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

(Дополнение N 2473-81 от 22 октября 1981 г.)

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

 

1. Краткая характеристика пестицидов

 

1.1. Перметрин (анометрин Н, амбуш, стомозан, мухотоксин, персан, корсар, пермасект) - 3-феноксибензил-(1RS)-цисранс-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат.

 

                               //\      //\

    Cl       H    H           //  \    //  \

      \C=C───┴────┴── C-O-CH -│   ││-O-│   ││

      /      \  /   ││     2 \\  /    \\  /

    Cl   H     \/     O        \\/      \\/

            CH /\CH

              3    3

 

    Эмпирическая формула C  H  Cl O .

                          21 20  2 3

    М.м. 391,28.

    В  чистом виде  в зависимости от соотношения изомеров - вязкая

жидкость,  воскообразная  масса  или кристаллы со слабым запахом и

температурой  плавления 34 - 39 °C. Температура кипения 200 °C при

0,01  мм  рт.  ст. (1,3 Па) и 220 °C при 6,05 мм рт. ст., давление

                            -7

паров  -  3,7  -  4,5  х  10    мм,  летучесть  - 0,007 мг/куб. м,

показатель  преломления - ПД   - 1,5627, плотность - 1,190 - 1,272

                            25

г/куб. см при 20 °C. Растворимость в воде - 1 - 10 мг/л, гексане и

этиленгликоле  -  до 30 г/л. Хорошо растворим в метаноле, этаноле,

циклогексане,   ацетоне,  хлороформе,  диэтиловом  эфире.  Быстрее

гидролизуется в щелочной и сильнокислой среде.

    ЛД    в зависимости от препаративной формы - 450 - 4000 мг/кг,

      50

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 3 мг/куб. м, в атмосферном воздухе -

0,002  мг/куб.  м,  в  воде  водоемов - 0,05 мг/л. Нормативы МДУ в

продуктах питания находятся в стадии утверждения.

    1.2.  Циперметрин  (цинометрин,  фендона, цимбуш, альфаметрин,

эктомин,   ренигейд,   беррикейд,   фастак)  -  3-фенокси-(R,S)-2-

цианобензил-(1R,S)-цисранс-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-диметилцикло-

пропанкарбоксилат.

 

    Cl\     H    H

       C=C──┴────┴─── C --O--CH-- // \ --O-- // \

    Cl/     \  /     ││           ││        ││

         H    \/       O     CN   \\ /       \\ /

              /\

            CH  CH

              3   3

 

    Эмпирическая формула C  H  O NCl .

                          22 19 3   2

    М.м. 416,30.

    Чистое  вещество   в  зависимости  от  соотношения  изомеров -

вязкая  жидкость, воскообразная  масса  или кристаллы. Температура

плавления  1R  цис S + 1S цис R изомеров - 80,5 °C. Давление паров

           -6              -9

1,29  х  10    -  1,3  х 10   мм рт. ст. при 20 °C. Плотность 1,12

г/куб.  см  при  20  °C. Растворимость в воде - 0,5 - 1, гексане -

142,  ксилоле  -  315  мг/л.  Хорошо растворим в низкомолекулярных

кетонах,   спиртах,   хлорсодержащих  углеводах.  Гидролизуется  в

щелочной среде.

    ЛД    в  зависимости  от  препаративной формы 79 - 5000 мг/кг.

      50

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,3 мг/куб. м, в атмосферном воздухе

- 0,0005 мг/куб. м, в воде водоемов - 0,03 мг/л.

    Нормативы   МДУ   в   продуктах  питания  находятся  в  стадии

утверждения.

    1.3.    Фенвалерат   (сумицидин,   бельмарк,   OM   S-200)   -

3-фенокси-(R,S)-цианобензил-(R,S)-2-(4-хлорфенил)-3-метилбутират.

 

         ---                      ---         ---

    Cl_//   \\___CH__C __O__CH__//   \\__O__//   \\

       \ ___ /   /   ││     ││  \ ___ /     \ ___ /

         ---    CH    O      CN   ---         ---

                /\

              CH  CH

                3   3

 

    Эмпирическая формула C  H  O NCl.

                          25 22 3

    М.м. 419,91.

    Кристаллы  с  температурой  плавления 23 °C.  Давление паров -

          -7

2,3  х  10    мм рт. ст. В воде не растворим. Растворим в гексане.

Хорошо   растворим   в   ацетоне,   ксилоле   и  низкомолекулярных

одноатомных спиртах. Гидролизуется в щелочной среде.

    ЛД    при оральном введении для крыс 451 мг/кг, ОБУВ в воздухе

      50

рабочей зоны - 0,3 мг/куб. м, в атмосферном воздухе  -  0,0003 мг/

куб. м, в воде водоемов - 0,03 мг/л.

    1.4.  Декаметрин  (дельтаметрин,  децис,  к-отрин,  бутокс)  -

3-фенокси-(S)-а-цианобензил-(1R,3R)-цис,-3-(2,2-дибромвинил)-2,2-

диметилциклопропанкарбоксилат.

 

             CH   CH

               3\/  3

    Br   H      /\      O

      \       /  \    ││        / \\       // \

       C=C──┬───────┬──C -O-CH- ││   │──O──│   ││

     /      H       H           \ //       \\ /

    Br                      CN

 

    Эмпирическая формула C  H  O Br .

                          22 19 3  2

    М.м. 505,21.

Белое кристаллическое вещество без запаха с температурой плавления 98 - 101 °C. Давление паров 1,5 х 10-8 мм рт. ст. при 25 °C. В воде не растворим, в этаноле - 16, ксилоле - 250, этилацетате - 350 и ацетоне - 500 г/л. Термически устойчив. Гидролизуется в щелочной среде.

    ЛД    - 67 мг/кг. ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м,

      50

в атмосферном воздухе - 0,0001 мг/куб. м,  в воде водоемов - 0,005

мг/л.

 

2. Методика определения пиретроидов

методом газожидкостной хроматографии в молоке и мясе

 

2.1. Основные положения

 

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении пиретроидов из молока и мяса ацетоном или его 85-процентным раствором с последующей переэкстракцией в смесь гексана с диэтиловым эфиром и концентрировании экстракта. Идентификация (по временам удерживания) и количественное определение (по сумме изомеров) осуществляются на газовом хроматографе с детектором по захвату электронов. Специальную очистку экстрактов в системе гексан - ацетонитрил проводят при значительном содержании жира в пробах, а адсорбционно-хроматографическую на колонке с силикагелем при повышенном загрязнении проб фоновыми хлорорганическими соединениями и продуктами их трансформации.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Минимально детектируемое количество: перметрина - 0,5; циперметрина - 0,2; фенвалерата - 0,5; декаметрина - 0,5 нг.

Нижний предел определения в молоке и мясе: перметрина - 0,01; циперметрина - 0,005; фенвалерата - 0,01; декаметрина - 0,01 мг/кг/л.

Доверительные интервалы среднего значения при p = 0,95 и n = 6:

а) в молоке для перметрина - 58 +/- 9,8, циперметрина - 8,1 +/- 9,8; фенвалерата - 78 +/- 10,5 и декаметрина - 74 +/- 10,4%;

б) в мясе для перметрина - 53 +/- 10,8; циперметрина - 76 +/- 10,8; фенвалерата - 78 +/- 11,0 и декаметрина - 72 +/- 11,7%.

2.1.3. Избирательность метода

Фосфор- и хлорорганические пестициды не мешают определению.

 

2.2. Реактивы и растворы

 

Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.

н-Гексан хч, ТУ 6-09-3375-78.

Ацетонитрил ч, ТУ 6-09-3534-87.

Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6265-79.

Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76.

Бутиловый эфир уксусной кислоты ч, ГОСТ 22300-76.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Насадка 30% OV-17 на инертоне-супер (0,125 - 0,160 мм) (ЧССР).

Силикагель, 0,1 - 0,4 мм (ЧССР).

Этиловый спирт - ректификат, ГОСТ 5962-67.

Раствор ацетона 85% водный.

Смесь гексана с диэтиловым эфиром в объемном соотношении 1:1.

Стандартный раствор пиретроидов в гексане с содержанием 1 нг в 1 мкл (срок хранения 1 год при герметичной упаковке).

 

2.3. Приборы и посуда

 

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-11081-83.

Фарфоровые выпарительные чашки, ГОСТ 9147-80, на 25 и 100 мл.

Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, на 100 и 250 мл.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл.

Воронки химические, ГОСТ 25336-82, ТУ 25-11-917-76.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов - тип "Цвет", "Газохром" и др.

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на 300 мл.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2.833.106.

Воронка фильтрующая ЕФ-1-20-ПОР-100, ГОСТ 25336-82.

Пипетки на 1 мл, ГОСТ 20292-74.

Мясорубка хозяйственная.

Холодильник бытовой.

Центрифуга типа ЦЛР-1.

 

2.4. Подготовка к определению

 

2.4.1. Подготовка газохроматографической колонки

Стеклянную колонку длиной 500 мм с внутренним диаметром 3 мм заполняют одним из принятых способов готовой набивкой инертон-супер с 3% OV-17. Колонку кондиционируют при 260 °C, продувая газ-носитель со скоростью 60 мл/мин. в течение 8 часов.

2.4.2. Отбор и подготовка проб

Отбор проб производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды" (N 2051-79, утверждены Минздравом СССР 21.08.79).

 

2.5. Проведение определения

 

2.5.1. Экстракция

Молоко. В колбу с притертой пробкой объемом не менее 300 мл заливают 50 мл молока анализируемой пробы и 150 мл ацетона. Содержимое интенсивно перемешивают, встряхивая колбу не менее 5 минут, и помещают в холодильник при температуре 0 - +3 °C на 6 - 24 часа. Затем нерастворенные компоненты молока отделяют от ацетонового раствора центрифугированием или фильтрованием. Осадок размельчают с помощью размельчителя тканей или шпателем в 25 мл 85-процентного ацетона и переносят в колбу, использованную для первоначальной экстракции. В эту же колбу приливают еще 75 мл 85-процентного ацетона, которым предварительно обмывают оборудование, примененное для размельчения осадка. Колбу с содержимым встряхивают в течение 10 минут и помещают в холодильник на 2 часа. Ацетоновый раствор отделяют от нерастворенных компонентов фильтрованием или центрифугированием. Ацетоновые экстракты объединяют, добавляют 10 мл бутилового эфира уксусной кислоты и испаряют ацетон из экстракта на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40 °C. Отгонку после испарения ацетона сразу же прекращают, не допуская испарения воды и бутилового эфира уксусной кислоты. Остаток экстракта переносят в делительную воронку, приливают 30 мл смеси диэтилового эфира с гексаном (1:1) и экстрагируют пиретроиды, встряхивая воронку в течение 5 минут. Слоям дают разделиться. При медленном разделении слоев добавляют при легком встряхивании 5 - 10 мл этилового спирта. Нижний слой сливают в другую делительную воронку и повторяют экстракцию 30 мл смеси диэтилового эфира с гексаном (1:1). Гексанэфирную фракцию объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, переносят в выпарительную чашку и испаряют досуха под тягой в вытяжном шкафу. Экстракт периодически подливают так, чтобы его количество за все время испарения не превышало одной трети общего объема чашки. Допускается подогрев экстракта до 30 °C, чем удается предотвратить конденсацию воды на стенках чашек и ускорить испарение растворителей.

Мясо. Пробы предварительно пропускают через мясорубку или размельчают ножницами. Отбирают навеску 25 г и гомогенизируют в 25 мл 85-процентного водного раствора ацетона. К гомогенату приливают еще 50 мл раствора ацетона, встряхивают или перемешивают в течение 10 минут и помещают в холодильник при температуре 0 - +3 °C на 6 - 24 часа. Дальнейший ход анализа такой же, как и при определении пиретроидов в молоке. Сухой остаток экстрактов из молока или мяса растворяют в 1 мл бутилового эфира уксусной кислоты. В испаритель вводят 2 - 6 мкл этого раствора.

Если полученные экстракты оказались недостаточно чистыми, что получается при значительном содержании жира или фоновых хлорорганических пестицидов в пробе, и количественное определение пиретроидов затруднено, проводят очистку с ацетонитрилом и (или) на колонке с силикагелем. Для этого конечные экстракты переносят в выпарительные чашки и испаряют досуха.

2.5.2. Очистка экстракта

Очистка с ацетонитрилом. К сухому остатку для его набухания приливают 1 мл ацетона и через 2 - 3 минуты 5 мл гексана. Покачивая чашку, тщательно обмывают ее поверхность и сливают раствор в делительную воронку. Чашку еще раз обмывают 5 мл гексана и сливают раствор в ту же воронку. Приливают 10 мл ацетонитрила и интенсивно встряхивают 2 минуты. Слоям дают разделиться. Нижний (ацетонитрильный) слой сливают в другую воронку. А из гексанового раствора экстракцию повторяют еще дважды, каждый раз применяя по 5 мл ацетонитрила. К объединенному ацетонитрильному раствору приливают 40 мл дистиллированной воды и 30 мл смеси диэтилового эфира с гексаном (1:1). Встряхивают воронку в течение 2 минут. Слоям дают разделиться. Нижний слой сливают в другую воронку, приливают 30 мл той смеси и экстракцию повторяют. Гексанэфирный экстракт объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, переносят в выпарительную чашку и испаряют растворителем досуха.

Очистка на колонке с силикагелем. Очистку экстракта проводят на специальном устройстве (см. рис. - не приводится). Для его подготовки пробирку отсоединяют. В воронку засыпают 4,0 - 4,5 куб. см силикагеля, приливают 5 мл гексана, тщательно перемешивают содержимое стеклянной глазной палочкой и, включая вакуум, отсасывают гексан из воронки в колбу. Силикагель дополнительно промывают 10 мл смеси диэтилового эфира с гексаном (1:1) порциями по 5 мл и в заключение - 5 мл гексана. После этого колонка готова к работе.

Сухой остаток экстракта смывают с выпарительной чашки 15 мл гексана порциями по 5 мл. Каждую порцию смыва (5 мл) сливают в воронку устройства и перемешивают с силикагелем в течение 3 минут. Не прекращая перемешивания, включают вакуум и медленно по каплям отсасывают гексан в колбу. Так поступают с каждой порцией смыва. Силикагель промывают 20 мл гексана порциями по 5 мл. Но в этом случае гексан полностью из колонки не удаляют. Как только мениск гексана достигает верхнего уровня силикагеля, вакуум отключают, добавляют следующую порцию растворителя, слегка помешивая стеклянной палочкой, выравнивают слой силикагеля, а затем включают вакуум. Так поступают и с последней порцией растворителя. Затем с помощью резиновой муфты закрепляют пробирку, вводя в нее стебель воронки. Пиретроиды элюируют 12 мл смеси диэтилового эфира с гексаном (1:1), постоянно подливая смесь, и полностью отсасывают элюат в пробирку. Элюат переносят в выпарительную чашку и испаряют почти досуха. Остаток растворяют в 1 мл бутилового эфира уксусной кислоты. В испаритель хроматографа вводят 2 - 6 мкл этого раствора.

2.5.3. Условия хроматографирования

    а)  хроматограф "Цвет-106" с детектором по захвату электронов.

Стеклянная  колонка  размером  500 x 2 мм с насадкой инертон-супер

(0,125  -  0,160  мм)  с 3% OV-17. Температурные режимы: термостат

колонки  -  250,  испарителя  - 280 и детектора - 270 °C. Скорость

газа-носителя  (азота)  -  28 мл/мин., на продувку детектора - 120

                                    -10

мг/мин.  Шкала электрометра - 1 x 10    А. Скорость протяжки ленты

-  200  мм/час.  Линейный  диапазон  детектирования - 0,2 - 10 нг.

Абсолютное время удерживания: перметрина - 2,52 мин., циперметрина

- 3,20 мин., фенвалерата - 4,66 мин., декаметрина - 6,33 мин.

    б)  хроматограф  "Цвет-550"  с  детектором постоянной скорости

рекомбинации.  Стеклянная  колонка  размером 500 x 3 мм с насадкой

инертон-супер (0,125 - 0,160 мм) с 3% OV-17. Температурные режимы:

термостат  колонки  -  260,  испарителя - 270, детектора - 280 °C.

Скорость газа-носителя (азота) - 60 мл/мин.  Шкала  электрометра -

      -9

8 x 10  . Скорость протяжки ленты самописца - 200 мм/час. Диапазон

определяемых   концентраций   0,2   -   10  нг.  Абсолютное  время

удерживания: перметрина - 2,14, циперметрина - 3,05, фенвалерата -

4,42 и декаметрина - 6,88 мин.

В качестве альтернативной может быть использована стеклянная колонка размером 500 x 3 мм с насадкой хроматон N-AW-HDMC (0,125 - 0,160 мм) с 5% SE-30.

 

2.6. Обработка результатов анализа

 

Количественное определение проводят методом сравнения со стандартом по площади пика анализируемого соединения в пробе и известном количестве стандарта. Площадь пика находят одним из общепринятых методов. Содержание пиретроидов в анализируемом материале (C) в мг/кг (л) находят по формуле:

 

                         S  x C   x V x 100

                          р    ст

                     C = ------------------,

                          S   x V  x P x K

                           ст    а

 

    где:

    S  - площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;

     р

    S   - площадь пика стандарта, кв. мм;

     ст

    C   - содержание пиретроидов в стандарте, нг;

     ст

    V   -  объем  раствора,  из  которого  отбирают  аликвоту  для

инъекции, мл;

    V  - объем аликвоты, которую вводят в хроматограф, мкл;

     а

    P - навеска или объем анализируемого образца, г или мл;

    K - процент определения.

 

3. Требования безопасности

 

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе с легковоспламеняющимися растворителями, взрывоопасными и высокотоксичными веществами.

 

 






Яндекс цитирования

© www.ussrdoc.com, 2011.