Полное собрание законодательства СССР
Система доступа к базе всех нормативно-правовых актов Союза Советских Социалистицеских Республик.
www.ussrdoc.com

 





Сборники документов по хронологии с 1917г по 1992г
| Сборник 1 | Сборник 2 | Сборник 3 | Сборник 4 | Сборник 5 | Сборник 6 | Сборник 7 | Сборник 8 | Сборник 9 | Сборник 10 |



 

Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 5039-89

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НИССОРАНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,

РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ (ЗЕЛЕНАЯ МАССА И ПЛОДЫ

ВИНОГРАДА, ЯБЛОКИ) МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

 

--------------------------------

<*> Разработаны Т.М. Петровой, О.К. Остроуховой (ВИЗР); Н.В. Бажановой, Ж.А. Арутюнян, М.Г. Алтунян (АрмНИИЗР).

 

    Краткая  характеристика  препарата.  Ниссоран - инсектицид. Действующее

вещество -  транс-5-[4-хлорфенил]-N-циклогексил-4-метил-2-оксотиазолидин-3-

карбоксамид.   Брутто-формула  C  H ClN O S .  Молекулярная  масса   352,9.

                                17 2   2 2 2

Общепринятое название  - гексатиазокс.  Химически  чистое  вещество - белый

порошок. Т. пл. 105,5 °C. Растворимость в воде при pH 5,9 - 1 мг/мл. Период

полураспада в водном растворе при 22 °C и pH 5 - 7 составляет  7000 ч;  при

pH 9 - 12 - 12000 ч. Растворяется в большинстве органических растворителей.

Ниссоран относится к группе препаратов средней токсичности для теплокровных

животных.  Применяют в борьбе с клещами на плодовых, цитрусовых насаждениях

и на виноградниках.

Принцип метода. Метод основан на экстракции ниссорана из проб органическим растворителем, очистке переэкстракцией и количественном определении методами ТСХ или ГЖХ с ДЭЗ или ДПР.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 129.

 

Таблица 129

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА (p = 0,95, n = 5)

 

┌───────────────┬──────────────────┬───────────────────┬──────────────────┐

│ Анализируемый │    Минимально       Нижний предел   │ Среднее значение │

    объект       детектируемое      определения,      определения, % 

               │ количество, мкг    мг/л или мг/кг                    

├───────────────┴──────────────────┴───────────────────┴──────────────────┤

                       Тонкослойная хроматография                       

                                                                        

│Вода           │1                 │0,02               │93,0 +/- 1,8     

│Почва          │10                │0,1                │77,0 +/- 3,7     

│Яблоки         │5                 │0,2                │78,0 +/- 3,0     

│Виноград       │3                 │0,1                │82,0 +/- 2,2     

                                                                        

                      Газожидкостная хроматография                      

                                                                        

│Вода                             │0,0005             │94,0 +/- 2,0     

│Почва                            │0,02               │76,0 +/- 3,2     

│Яблоки                           │0,02               │76,0 +/- 3,6     

└───────────────┴──────────────────┴───────────────────┴──────────────────┘

 

Избирательность метода. Избирательность метода ГЖХ обеспечивается сочетанием селективных детекторов и неподвижных фаз различной полярности, а ТСХ - выбором систем хроматографирования и проявляющих реагентов. В предлагаемых условиях хроматографирования другие пестициды определению не мешают.

    Реактивы   и   растворы.  Ацетон  х.ч.  Ацетонитрил  ч.  н-Гексан  х.ч.

Двухромовокислый  калий  х.ч.  Йодид  калия  ч. Марганцовокислый калий х.ч.

Сульфат  кальция  двухводный  ч.д.а. (в течение 1 - 2 сут. прокаливают  при

температуре  180  °C  и  просеивают  через сито размером 100 меш, хранят  в

склянке  с  притертой  крышкой).  Хлорид  кальция ч. Крахмал растворимый ч.

Едкий  натр ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а.  (предварительно прокаливают

до  300  -  400  °C).  Хлорид  натрия ч.д.а.  Петролейный эфир (40 - 70 °C)

свежеперегнанный.  Хроматографические  пластинки  "Силуфол"  УФ   .  Серная

                                                               254

кислота   ч.д.а.   Силикатный   сорбент   КМК-20.   Силикагель  марки  КСК.

Хлороводородная  кислота  особой  чистоты.  Хлороформ  х.ч.  Этиловый спирт

ректиф.  Неподвижная  жидкая  фаза:  5%  SE-30  или  5%  XE-60 на хроматоне

N-AW-DMCS (0,160 - 0,200 мм).    Газ-носитель  -   азот   особой   чистоты.

Стандартный  раствор  ниссорана  в  н-гексане  - 5 мкг/мл (ГЖХ), 200 мкг/мл

(ТСХ). Растворы стабильны в течение 3 мес.  при  хранении  в  холодильнике.

Проявляющий реагент: 50 мл 1-процентного раствора  йодида  калия  смешивают

с  50 мл 3-процентного  свежеприготовленного  растворимого крахмала и 20 мл

этилового спирта. Готовят перед употреблением.

Приборы, аппаратура и посуда. Аппарат для встряхивания колб. Ротационный вакуумный испаритель. Вата гигроскопическая. Весы аналитические. Весы равноплечие ручные. Воронки делительные; химические. Газовый хроматограф с ДЭЗ пли ДПР. Камера для хроматографирования. Колбы мерные и конические со шлифами. Микропипетки на 0,1 и 0,2 мл. Микрошприц на 10 мкл. Пипетки на 1 и 10 мл. Пульверизатор стеклянный для обработки хроматограмм. Сушильный шкаф. Холодильник бытовой. Камера для опрыскивания хроматографических пластинок. Хроматографическая стеклянная колонка длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

Подготовка к определению. Приготовление пластинок для ТСХ. Стеклянные пластинки перед нанесением на них сорбента тщательно моют сначала в хромовой смеси, затем промывают водой до нейтральной реакции. Далее их протирают спиртом и высушивают на воздухе. Нанесение сорбента КМК-20: для приготовления одной пластинки (9 x 12 см) берут 0,7 г сорбента КМК-20, прибавляют 5 мл воды и 10% от массы сорбента гипса. Готовят их сразу в количестве 10 - 20. Смесь тщательно растирают и однородную массу наносят на пластинку легким покачиванием для растекания по всей поверхности. Сушат пластинки в течение 24 ч на воздухе. Хранят в эксикаторе над хлоридом кальция. Сорбент КМК-20 можно наносить на пластинку и без закрепляющей основы - гипса. Нанесение силикагеля: 30 г силикагеля, 5 г гипса и 100 мл воды тщательно размешивают и наносят на пластинку так, как описано выше.

Подготовка хроматографической колонки (ГЖХ). Стеклянную колонку промывают смесью органических растворителей ацетон - этиловый спирт - петролейный эфир (1:1:1). Для этого смесь заливают на 1 ч в колонку, а затем промывают 300 мл ацетона. Колонку сушат в токе азота и заполняют сорбентом с нанесенной на него фазой с помощью вакуумного насоса. Колонку кондиционируют при 270 °C в течение 8 ч. Скорость потока азота 30 - 40 мл/мин.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Навеску листьев (25 г) измельчают, а яблоки и плоды винограда гомогенизируют, заливают 150 - 200 мл 75-процентного водного ацетона, встряхивают в течение 1 ч и оставляют на ночь. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр. Остаток промывают дважды по 30 мл 75-процентным водным ацетоном. Фильтраты объединяют, помещают их в делительную воронку, добавляют 70 - 90 мл дистиллированной воды и 1 - 3 г хлорида натрия. Очистку проводят переэкстракцией ниссорана в н-гексан тремя порциями по 25 - 30 мл. Гексановые фракции отделяют, осушают путем фильтрования через безводный сульфат натрия, переносят в круглодонную колбу и концентрируют под вакуумом при температуре 40 °C до 1 - 5 мл (ГЖХ) или до 0,1 - 0,3 мл (ТСХ).

    Навеску почвы (25 г) заливают 70 мл смеси ацетон - 0,05 н  CaCl  (1:1),

                                                                   2

встряхивают 1 ч и оставляют на ночь.  Далее  анализ ведут так,  как описано

для  растительных  проб,  но  остаток  промывают  смесью ацетона и раствора

хлорида кальция.

К 200 мл анализируемой пробы воды прибавляют 25 - 30 мл петролейного эфира, закрывают колбу стеклянной притертой пробкой и встряхивают на аппарате 1 ч. Экстракцию повторяют трижды. Слои с петролейным эфиром отделяют, высушивают фильтрованием через слой безводного сульфата натрия. Объединенные экстракты концентрируют на ротационном испарителе при температуре 40 °C до 1 - 5 мл (ГЖХ) или до 0,1 - 0,3 мл (ТСХ).

    Условия   хроматографирования.  Условия  определения  методом  ТСХ:  На

стартовую  линию пластинки микропипеткой количественно наносят пробу, рядом

с  пробой - стандартные растворы ниссорана - 5 и 10 мкг. Пластинку помещают

в  хроматографическую  камеру,  куда  за  10  -  15  мин. до этого наливают

подвижный  растворитель:  для  силикагелевых  пластинок используют гексан -

ацетон  (4:1),  а  для  пластинок  с  КМК-20 - гексан - ацетон (9:1). После

хроматографирования  пластинку  высушивают  на воздухе, помещают в камеру с

газообразным  хлором  на  10 мин., который получают, смешивая равные объемы

1,5-процентного раствора калия марганцовокислого и 10-процентного  раствора

хлороводородной  кислоты.  После  этого  пластинку  оставляют на воздухе до

полного  исчезновения запаха хлора. Затем пластинку опрыскивают проявляющим

реагентом.  Ниссоран  проявляется в виде сине-фиолетовых пятен на сероватом

фоне пластинки. В предлагаемых условиях хроматографирования R  ниссорана на

                                                             f

пластинках силикагеля - 0,50, а на КМК-20 - 0,45.

Условия определения методом ГЖХ. Хроматограф с ДЭЗ или ДПР. При работе с колонкой, заполненной 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,125 - 0,160 мм). Температура, °C: колонки - 240, испарителя и детектора - 270. Скорость газа-носителя (азота) 35 мл/мин. Время удерживания ниссорана в этих условиях 2 мин. 7 с. Минимально детектируемое количество 0,5 нг. Диапазон линейности 0,5 - 10,0 нг. При работе с колонкой, заполненной 5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS (0,160 - 0,200 мм). Температура, °C: колонки - 250, испарителя и детектора - 270. Скорость газа-носителя 40 мл/мин. В этих условиях время удерживания составляет 3 мин. 25 с. Минимально детектируемое количество 0,4 нг. Диапазон линейности 0,5 - 15,0 нг.

Обработка результатов анализа. Метод ТСХ. Количественное определение производят путем сравнения площадей пятен стандартных растворов и проб. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией соблюдается в пределах 1 - 20 мкг. Концентрацию ниссорана (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:

 

                                      A

                                  X = -,

                                      P

 

где:

A - количество препарата, найденное в пробе, мкг;

P - навеска или объем анализируемой пробы, г или мл.

Метод ГЖХ. Содержание ниссорана в анализируемой пробе (X, мг/кг или мг/л) определяют методом соотношения пиков стандарта и проб и рассчитывают по формуле:

 

                                    H CV

                                     2

                                X = -----,

                                    V H P

                                     1 1

 

    где:

    C   -   количество   препарата  в  стандартном  растворе,  введенном  в

хроматограф, нг;

    H , H  - высоты пиков соответственно стандарта и пробы, мм;

     1   2

    V  - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф, мкл;

     1

    V - объем анализируемой пробы, мл.

    P - навеска пробы, г.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила предосторожности при работе с токсичными, взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.

 

 






Яндекс цитирования

© www.ussrdoc.com, 2011.