Полное собрание законодательства СССР
Система доступа к базе всех нормативно-правовых актов Союза Советских Социалистицеских Республик.
www.ussrdoc.com

 





Сборники документов по хронологии с 1917г по 1992г
| Сборник 1 | Сборник 2 | Сборник 3 | Сборник 4 | Сборник 5 | Сборник 6 | Сборник 7 | Сборник 8 | Сборник 9 | Сборник 10 |



 

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

В.Е.КОВШИЛО

30 октября 1980 г. N 2264-80

 

ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫЕ КОНЦЕНТРАЦИИ

ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ПОЧВЕ (ПДК)

 

┌───┬─────────────────────┬─────────┬────────────────────────────┐

│ N │    Наименование     │ПДК мг/кг│     Методы определения    

п/п│      вещества         почвы                             

├───┼─────────────────────┼─────────┼────────────────────────────┤

│1. │Дилор                │0,5      │см. Приложение N 1         

│2. │Гептахлор            │0,05     │"                          

│3. │Цинеб                │1,8      │"                          

│4. │Пропанид             │1,5      │"                          

│5. │Гардона              │1,4      │"                          

│6. │Банвел Д             │0,25     │"                          

│7. │Мышьяк               │2,0      │"                          

│8. │Формальдегид         │7,0      │"                          

│9. │Базудин              │0,2      │см. Приложение N 2         

│10.│Метафос              │0,1      │"                          

│11.│Рогор                │0,3      │"                          

│12.│Фозалон              │0,5      │"                           

│13.│Фталофос             │0,1      │"                          

│14.│Прометрин            │0,5      │см. Приложение N 3         

│15.│Хлорофос             │0,5      │"                          

│16.│Карбофос             │2,0      │"                           

│17.│Хлорамп              │0,05     │"                          

│18.│Бенз(а)пирен         │0,02     │см. утвержденные ПДК       

                                 │N 1968-79 от 21.02.1979    

│19.│Свинец <*>           │20,0     │"                          

       +6                                                   

│20.│Хром                 │0,05     │"                          

│21.│Ртуть                │2,1      │"                          

│22.│Кельтан              │1,0      │"                          

│23.│ДДТ                  │1,0      │Хроматография в тонком слое,│

                                 │ВНИИГИНТОКС (основной) <**> │

│24.│Гексахлоран          │1,0      │"                          

│25.│Гамма изомер гекса-  │1,0      │"                          

   │хлорана                                                  

│26.│Полихлорпинен        │0,5      │"                          

│27.│Полихлоркамфен       │0,5      │"                          

│28.│Севин                │0,05     │"                          

└───┴─────────────────────┴─────────┴────────────────────────────┘

 

--------------------------------

<*> ПДК свинца 20 мг/кг почвы без учета среднего фона, равного 12 мг/кг (А.П. Виноградов. Геохимия редких и рассеянных химических элементов в почвах. М. 1950, стр. 220).

<**> Методы определения пестицидов в почве опубликованы в следующих источниках:

а) Методическое письмо "Определение содержания остаточных количеств ДДТ, его метаболита ДДЕ и других хлорорганических пестицидов в почве методом хроматографии на бумаге и в тонком слое". Киев. 1968.

б) Журнал "Химия в сельском хозяйстве". 1969, 43 - 45.

в) Методическое письмо по определению севина в почве. Киев. 1968.

Контроль за содержанием пестицидов в почве осуществляется в весенний, летний и осенний периоды. Отбор проб почвы проводится в пахотном слое (0 - 30 см).

 

Примечание: В настоящий документ включены ранее утвержденные ПДК (N 1134-73; N 1496-76; N 1968-79).

 

 

 

 

 

Приложение N 1

 

МЕТОДЫ,

ПРЕДЛОЖЕННЫЕ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ПОЧВЕ

 

1. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИЛОРА В ПОЧВЕ

ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ

 

Принцип и характеристика метода

 

Метод основан на экстракции пестицида н-гексаном из пробы почвы, очистке экстракта, его концентрировании и хроматографии в слое окиси алюминия. В качестве подвижного растворителя используется н-гексан. Количественное определение препарата проводится путем сравнения площадей пятен пробы и стандартов. Метод позволяет определить 0,5 мкг дилора в пробе. Полнота определения 90 +/- 10%. Метод специфичен.

 

Аппаратура и посуда

 

Колбы конические с притертыми пробками на 700 мл.

Воронки для фильтрования.

Делительные воронки на 250 мл.

Аппарат для встряхивания.

Прибор для отгонки растворителей.

Микропипетки для нанесения стандартных растворов.

Пипетки или шприцы для нанесения проб.

Лабораторный штатив.

Камера для хроматографирования.

Стеклянные пластинки 9 х 12 см. Они покрываются сорбционной массой. Сорбционная масса для приготовления четырех пластинок состоит из 5 г окиси алюминия, 0,5 г медицинского гипса и 7,5 мл дважды перегнанной воды.

Пульверизатор стеклянный.

Ртутно-кварцевая лампа.

 

Реактивы и растворы

 

1. Н-гексан.

2. Серная кислота, х.ч., концентрированная.

3. Окись алюминия безводная, ч.д.а.

4. Кальций сернокислый, ч.д.а. Просушивают в сушильном шкафу 6 ч при 150 - 160 °С. Хранят в банке с притертой пробкой.

5. Натрий сернокислый безводный, х.ч.

6. Спирт этиловый.

7. Серебро азотнокислое.

8. 25-процентный раствор аммиака.

9. Проявляющий реактив (0,85 г азотнокислого серебра, 2,5 мл аммиака и 97 мл дважды дистиллированной воды).

10. Стандартный раствор дилора (100 мкг/мл).

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из 5 проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирают лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоев, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленки. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Проба упаковывается в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняется сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ.

Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатываются так же, как и поверхностные пробы.

 

Ход анализа

 

При определении дилора в почве навеску суховоздушной почвы (100 г), растертую в фарфоровой ступке и просеянную через почвенное сито 0,5, помещают в коническую колбу на 700 мл. Пробу почвы заливают до покрытия н-гексаном и взбалтывают в аппарате для встряхивания в течение часа.

Экстракт фильтруют через воронку, заполненную безводным сернокислым натрием. Пробу дважды промывают 30 - 40 мл н-гексана. Экстракты объединяют и переносят в делительную воронку, прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают несколько раз. Отделяют органический слой и отгоняют растворитель в приборе для отгонки до небольшого объема (0,3 - 0,5 мл). Этот объем количественно наносят пипеткой или шприцем на хроматографическую пластинку.

Хроматографическую пластинку с нанесенным экстрактом и стандартами в вертикальном положении помещают в камеру для хроматографирования и погружают на 1 см в подвижный растворитель (перегнанный н-гексан). Хроматографирование проводят до поднятия фронта подвижного растворителя на высоту 10 см. Затем пластинки высушивают, опрыскивают проявителем, хроматограммы подвергают ультрафиолетовому облучению до четкого появления пятен стандарта (10 - 30 минут). Идентификация дилора проводится по величине его Rf, которая равна 0,8.

 

Построение калибровочного графика

 

На пластинку для хроматографирования наносят стандартный раствор дилора (100 мкг/мл) в объеме 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5 мл, что соответствует 10, 20, 30, 40, 50 мкг дилора, а также разведение стандартного раствора 1:10 в объеме 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 мл, что соответствует 2, 4, 6, 8 мкг дилора.

Пластинки хроматографируют и обрабатывают так же, как и исследуемые пробы, определяют площади пятен и по полученным данным строят калибровочный график.

 

Расчет анализа

 

Измеряют площадь пятна пробы на пластинке для хроматографии и по калибровочному графику определяют количество дилора в пробе. Концентрацию дилора в почве рассчитывают по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация дилора в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на кг почвы.

 

2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕПТАХЛОРА В ПОЧВЕ

ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ

 

Принцип и характеристика метода

 

Метод основан на экстракции пестицида из пробы почвы органическим растворителем, очистке экстракта, его концентрировании и последующем хроматографировании в тонком слое сорбента. Подвижной фазой служит н-гексан. Место локализации препарата обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением. Количественное определение проводится путем измерения площадей пятен проб и стандартных растворов. Метод позволяет определить 1 мкг гептахлора в пробе почвы, полнота определения 90 +/- 5%. Определению гептахлора в почве могут мешать содержащиеся в ней примеси других хлорорганических пестицидов, в частности альдрина, ДДЭ, которые имеют близкую с гептахлором величину Rf.

 

Аппаратура и посуда

 

Колбы с притертыми пробками на 250 - 500 мл.

Шуттель-аппарат (аппарат для встряхивания).

Воронка с бумажным фильтром.

Водяная баня.

Прибор для отгонки растворителей (круглодонная колба на 50 - 100 мл со стеклянным переходником и холодильником).

Стеклянные пластинки для хроматографии размером 9 х 12 см.

Микропипетки для нанесения стандартных растворов (0,1 мл).

Микропипетки, пастеровские пипетки с оттянутым кончиком или шприцы для нанесения проб.

Камера для хроматографирования.

Пульверизатор стеклянный для опрыскивания пластинок.

Ртутно-кварцевая лампа.

Сита с отверстием 0,4 - 0,6 мм.

Сушильный шкаф.

Эксикатор для хранения готовых к употреблению хроматографических пластинок.

Пробирки центрифужные.

Пластинки для хроматографирования. Промытую хромовой смесью, дистиллированной водой и высушенную стеклянную пластинку 9 х 12 см протирают этиловым спиртом, хлороформом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Сорбционную массу готовят следующим образом: 5 г просеянной через сито 40 - 60 меш окиси алюминия смешивают в фарфоровой ступке или в склянке с 5 г очищенного и просеянного силикагеля КСК (или 5 г силикагеля LS 5/40 мю) и с 0,5 г сернокислого кальция (гипса), прибавляют 25 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают до образования однородной массы, наносят тонким слоем (толщина слоя 0,2 - 0,3 мм) на приготовленные соответствующим образом пластинки из расчета 1,0 г сорбционной массы на одну пластинку 9 х 12 см.

Сушат пластинки при комнатной температуре в течение суток, затем их активируют в сушильном шкафу при температуре 110 - 120 °С в течение 10 мин. и хранят в эксикаторе над слоем безводного хлористого кальция.

 

Реактивы и растворы

 

1. Н-гексан, х.ч.

2. Ацетон, х.ч.

3. Натрий сернокислый безводный, х.ч.

4. Окись алюминия для хроматографии, просеянная через сито 40 - 60 меш.

5. Готовый к употреблению силикагель LS 5/40 мю (ЧССР) или силикагель КСК, просеянный через сито 40 - 60 меш.

    6.   Кальций   сернокислый   (CaSO  х 2H O),   ч.д.а.  (гипс),

                                      4     2

просушенный  в сушильном шкафу при 150 - 160 °C в течение 6 часов.

Хранится в склянке с притертой пробкой.

7. Серебро азотнокислое, ч.д.а.

8. 25% раствор аммиака, ч.д.а.

9. Серная кислота, ч.д.а., концентрированная, уд. вес 1,84.

10. Стандартный раствор гептахлора (10 мг ГПХ, х.ч., растворяют в 100 мл ацетона, хранят в холодильнике в плотно закрытой склянке).

11. Проявленный реактив. К 0,75 г азотнокислого серебра прибавляют 15 мл дистиллированной воды, 35 мл ацетона и 5 мл 25-процентного водного раствора аммиака. Готовят в день употребления. На пластинку 9 х 12 см расходуется 8 - 12 мл раствора.

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из 5 проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирают лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоев, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленки. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Проба упаковывается в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняется сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ.

Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатываются так же, как и поверхностные пробы.

 

Ход анализа

 

Поступившие в лабораторию пробы почвы высушивают до воздушно-сухого состояния на бумаге в тени. После высушивания проба почвы перетирается в фарфоровой ступке и просеивается через почвенное сито с размером отверстий 0,5 мм.

Отобранную среднюю воздушно-сухую пробу почвы весом в 100 г помещают в колбу с притертой пробкой, заливают смесью н-гексан - ацетон (4:1) так, чтобы слой почвы был покрыт экстрагентом на 1,5 - 2 см. Экстракцию осуществляют на шуттель-аппарате в течение 2-х часов или оставляют на ночь. После экстракции экстракт отделяют от почвы с помощью фильтрации через бумажный фильтр и слой безводного сернокислого натрия. Пробу почвы снова заливают три раза растворителем (1 раз по 40 мл) и встряхивают 20 - 30 мин., а промывные порции фильтрата сливают вместе с первоначальным фильтратом. Сюда же отсасывают из почвы оставшийся в ней в адсорбированном состоянии экстракт с использованием воронки Бюхнера.

Полученный экстракт переносят в делительную воронку, прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают несколько раз. Отделяют органический слой и отгоняют растворитель в приборе для отгонки до небольшого объема (0,3 - 0,5 мл). Исследуемую пробу наносят пипеткой на хроматографическую пластинку. Хроматографическую пластинку с нанесенными растворами помещают в камеру, на дно которой за 30 мин. до начала хроматографирования наливают подвижный растворитель н-гексан так, чтобы край пластинки был погружен в него не более чем на 0,5 см.

После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на некоторое время для испарения растворителя.

Затем пластинку орошают с помощью пульверизатора проявляющим реактивом и подвергают ультрафиолетовому облучению (лампа ПРК-4 или БУВ-15) в течение 10 - 15 мин. до появления пятен серо-черного цвета величиной Rf = 0,62.

 

Построение калибровочного графика

 

На пластинку для хроматографирования наносят стандартный раствор гептахлора (100 мкг/мл) в объеме 0,01, 0,03, 0,05, 0,07, 0,1, 0,15, 0,20 мл, что соответствует 1, 3, 5, 7, 10, 15, 20 мкг гептахлора. Пластинки хроматографируют и обрабатывают так же, как и исследуемые пробы. Определяют площади пятен и по полученным данным строят калибровочный график. Он сохраняет прямолинейность в интервале концентраций 1 - 20 мкг ГПХ в пробе.

 

Расчет анализа

 

Измеряют площадь пятна пробы на пластинке для хроматографирования и по калибровочному графику определяют количество гептахлора в пробе. Концентрацию гептахлора в почве определяют, рассчитывая по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация гептахлора в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на кг почвы.

 

3. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИНЕБА В ПОЧВЕ

 

Принцип и характеристика метода

 

Метод <1> основан на кислотном гидролизе цинеба, очистке выделяющегося сероуглерода от сопутствующих соединений, адсорбции сероуглерода спиртовым раствором диэтиламина, взаимодействии продукта реакции с ацетатом меди, колориметрическом определении образующегося дитиокарбамата меди, окрашенного в желто-коричневый цвет. Метод позволяет определить 5 мкг цинеба в почве. Полнота определения - 90%.

--------------------------------

<1> М.А. Клисенко, М.Ш. Векштейн (ВНИИГИНТОКС).

 

Метод применим при отсутствии в почве цирама, ТМТД, манеба, марцина, поликарбацина, купрацина.

 

Аппаратура и посуда

 

Аспиратор.

Мерный цилиндр на 100 мл.

Отводная трубка, доходящая почти до дна колбы.

Пипетки разные.

Поглотители.

Поглотительная колонка вместимостью 300 - 500 мл, заполненная аскаритом или натронной известью и активированным углем.

Фотоэлектроколориметр.

Холодильник Либиха.

Широкогорлая колба с боковым отростком.

 

Реактивы и растворы

 

1. Серная кислота, х.ч., 5N раствор.

2. Уксуснокислый свинец, х.ч., 10% раствор.

3. 1,5% спиртовый раствор диэтиламина (свежеприготовленный).

4. Спирт этиловый.

5. Стандартный раствор цинеба (0,01 г препарата растворяют в 0,01 М растворе едкого натра в мерной колбе емкостью 100 мл. 1 мл раствора содержит 100 мкг цинеба).

6. Уксуснокислая медь, х.ч., 0,05% спиртовый раствор.

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из пяти проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирают лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоя, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленки. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Проба упаковывается в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняется сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ.

Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатываются так же, как и поверхностные.

 

Ход анализа

 

Пробу почвы (100 г), в которой необходимо определить остаточные количества цинеба, помещают в двугорлую колбу (широкогорлую колбу с боковым отростком). В колбу приливают 100 мл 5 н раствора серной кислоты.

Колбу соединяют с обратным холодильником. Отводную трубку, доходящую почти до дна колбы, соединяют с поглотительной колонкой. Отводную трубку холодильника последовательно соединяют с 2 парами поглотительных приборов. В первую пару наливают по 5 мл 10% раствора уксуснокислого свинца. Вторую пару поглотителей заполняют 1,5% спиртовым раствором диэтиламина (по 5 мл). Последний поглотитель присоединяют к аспиратору. Содержимое колбы подогревают до кипения. После этого включают аспиратор с небольшой скоростью (1 пузырек в секунду), протягивают воздух в течение 1,5 часа. Выделяющийся сероуглерод уносится потоком воздуха и поглощается во второй паре поглотителей. Первая пара поглотительных приборов служит для очистки сероуглерода от сероводородов и других сульфидов.

Через 1,5 часа от начала кипения содержимое второй пары поглотительных приборов переносят в пробирки. Приливают по 0,5 мл 0,05% спиртового раствора уксуснокислой меди (лучше свежеприготовленного). Общий объем в пробирке составляет 10 мл. В присутствии сероуглерода образуется окрашенный в желто-бурый цвет раствор дитиокарбамата меди. Через 2 - 3 минуты его колориметрируют на ФЭК-М с синим светофильтром в кювете толщиной слоя 10 мм. Количественную оценку полученных результатов проводят по калибровочному графику.

 

Построение калибровочного графика

 

Для построения калибровочного графика в навеску почвы вносят 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 мл свежеприготовленного щелочного раствора цинеба, которые соответствуют 5, 10, 20, 30, 40, 50 мкг препарата, и проводят определение по приведенной выше методике. По полученным данным строят калибровочный график. Он сохраняет прямолинейность в интервале концентраций от 5 до 50 мкг цинеба в почве.

 

Расчет анализа

 

Измеряют оптическую плотность раствора и по калибровочному графику определяют концентрацию цинеба в пробе почвы.

Концентрация цинеба в почве рассчитывается по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация цинеба в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на 1 кг почвы.

 

4. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОПАНИДА В ПОЧВЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Принцип и характеристика метода

 

Определение остатков пропанида и его метаболита, 3,4-ДХА в почве методом ТСХ основано на экстракции их органическим растворителем и последующем хроматографировании на пластинках "Силуфол" или стеклянных пластинках со слоем сорбента (силикагеля). В качестве подвижной фазы используется смесь бензола и ацетона (60:1,5).

Обнаружение пропанида и 3,4-ДХА производится путем опрыскивания хроматографических пластинок, предварительно подвергшихся хроматографии, проявляющими реактивами N I, II и III. Такая обработка ведет после термического разложения пропанида до ароматического амина к взаимодействию последнего с составными частями проявляющих реактивов и появлению фиолетовых пятен на белом фоне, имеющих Rf и окраску аналогично стандартному веществу.

Идентификация пропанида и его количественное определение производится путем сравнения площади или интенсивности пятен проб и стандартных растворов.

Определению содержания пропанида в почве мешают содержащиеся в почве коэстрактивные вещества, а также вещества, дающие при термическом разложении ароматические амины и имеющие близкую к пропаниду величину Rf. Метод позволяет определить 5 мкг препарата в пробе почвы.

 

Аппаратура и посуда

 

Колбы с притертыми пробками на 250 - 500 мл.

Аппарат для встряхивания.

Воронка Бюхнера.

Роторный испаритель.

Водяная баня.

Делительная воронка.

Прибор для отгонки растворителей (круглодонная колба на 50 - 100 мл со стеклянным переходником и холодильником).

Пластинки "Силуфол" или стеклянные пластинки для хроматографии.

Микропипетки.

Хроматографическая камера.

Сушильный шкаф.

Пульверизатор для опрыскивания пластинок.

Эксикатор для хранения хроматографических пластинок.

Стеклянная хроматографическая колонка.

Стекловата.

Пластинки для хроматографирования. Тщательно промытые хромовой смесью, водопроводной и дистиллированной водой и высушенные стеклянные пластинки 9 х 12 протирают этиловым спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Массу для пластинок готовят следующим образом: 10 г силикагеля смешивают с 1 г гипса, прибавляют 45 мл дистиллированной воды, несколько капель диэтилового эфира и полученную смесь взбалтывают в течение 15 минут. Этого количества смеси достаточно для 10 пластинок. После нанесения адсорбента пластинки в течение 20 часов сушат на воздухе при комнатной температуре, затем 30 минут в сушильном шкафу при 100 - 150 °С. Готовые пластинки хранят в эксикаторе над прокаленным силикагелем или в специальном шкафу.

Хроматографическая колонка для очистки экстрактов. Стеклянную хроматографическую колонку диаметром 15 мм, длиной 150 мм заполняют стекловатой, имеющей волокна 1 - 2 см (толщиной слоя 0,5 см). Далее колонку на 5,0 см заполняют флоризилом, прокаленным при 120 °С в течение 6 часов. Сверху насыпают безводный сернокислый натрий на 3 - 4 см, после чего промывают небольшим количеством смеси диэтилового эфира с н-гексаном (1:2).

 

Реактивы и растворы

 

1. Ацетон, х.ч.

2. Бензол, х.ч.

3. Н-гексан, х.ч.

4. Диэтиловый эфир, х.ч. или специально очищенный.

5. Едкий натр, ч.д.а., 20-процентный и 10 н водные растворы.

6. Натрий сернокислый безводный, ч.д.а.

7. Силикагель КСК, просеянный через сито 100 меш.

8. Флоризил (от 10 до 60 меш).

9. Хлороформ, х.ч.

10. Проявляющие реактивы: N 1 - 20 мл концентрированной HCl (d = 1,19) прибавляют 80 мл этилового спирта, N 2 - 1 г азотнокислого натрия растворяют в 2 мл воды и доводят до 100 мл этиловым спиртом, N 3 - 1 г 1-нафтиламина дигидрохлорида растворяют при нагревании на водяной бане в 2 мл воды и доводят до 100 мл этиловым спиртом.

11. Стандартный раствор пропанида: 25 мг пропанида растворяют в 50 мг хлороформа, концентрация этого раствора 500 мкг/мл.

12. Стандартный раствор 3,4-ДХА: 25 мг 3,4-ДХА растворяют в 50 мл хлороформа, концентрация этого раствора 500 мкг/мл.

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из пяти проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирают лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоев, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленки. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Проба упаковывается в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняется сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ.

Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатываются так же, как и поверхностные пробы.

 

Ход анализа

 

100 - 500 г почвы или почвенной суспензии, освобожденной от растительных остатков, заливают 100 - 300 мл ацетона, добавляют 3 - 5 мл 20% NaOH, тщательно перемешивают палочкой, после этого встряхивают в течение 1 часа. Затем водно-ацетоновый экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, колбу ополаскивают ацетоном (3 х 15 - 20 мл). Ацетон отгоняют на роторном испарителе, оставшуюся водную часть подщелачивают 20% NaOH до pH 10, переносят в делительную воронку и токсиканты экстрагируют хлороформом (3 х 20 - 30 мл). Объединенный экстракт высушивают, пропуская через безводный сернокислый натрий, и растворитель выпаривают досуха.

После экстракции токсикантов из почвы и отгона растворителя сухой остаток в колбе растворяют 10 мл смеси диэтилового эфира с н-гексаном (1:2). Полученный раствор пропускают через безводный флоризил.

Экстракты упаривают и количественно наносят на пластинки "Силуфол" или на стеклянные пластинки на расстоянии 20 мм от края, трижды обмывают колбу 2 - 3 мл диэтилового эфира; экстракты наносят так, чтобы диаметр пятна не превышал 4 - 6 мм. Пластинки с нанесенными пробами помещают в камеру для хроматографирования; подвижный растворитель - бензол, ацетон (60:1,5). Край пластинки погружают в растворитель на 5 - 7 мм. Когда фронт растворителя поднимается на 10 см, пластинку вынимают из камеры и просушивают. Затем камеру ополаскивают, вновь заполняют смесью растворителя и производят повторную разгонку. Для обнаружения и определения пропанида пластинку термостатируют 10 минут при 160 °С, затем охлаждают, опрыскивают последовательно проявляющими реактивами I, II, III. При наличии в пробе пропанида, его метаболита 3,4-ДХА появляются фиолетовые пятна на белом фоне, имеющие величину Rf для пропанида = 0,26 +/- 0,02; для 3,4-ДХА = 0,64 +/- 0,02.

 

Построение калибровочного графика

 

На пластинку для хроматографирования наносят стандартный раствор пропанида и 3,4-ДХА, содержащие 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 мкг пропанида и 3,4-ДХА. Пластинки хроматографируют так же, как и исследуемые пробы. Определяют площади пятен и по полученным данным строят калибровочный график. Он сохраняет прямолинейность в пределах от 5 до 40 мкг пропанида и 3,4-ДХА в пробе.

 

Расчет анализа

 

Измеряют площади пятен пробы на пластинке для хроматографии и по калибровочному графику определяют количество пропанида и его метаболита в пробе. Концентрацию пропанида в почве рассчитывают по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация пропанида или 3,4-ДХА в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на 1 кг почвы.

 

5. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГАРДОНЫ В ПОЧВЕ

ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ

 

Принцип и характеристика метода

 

Метод основан на экстракции пестицида из пробы почвы н-гексаном (хлороформом), очистке экстракта, его концентрировании и последующем хроматографировании в тонком слое окиси алюминия. Подвижной фазой служит хлороформ. Проявитель - аммиакат серебра в ацетоне. Количественное определение проводится путем измерения площадей пятен проб и стандартных растворов. Метод позволяет определить 1,0 мкг гардоны в пробе почвы. Полнота определения 85 - 90%. Метод специфичен.

 

Аппаратура и посуда

 

Ступка фарфоровая.

Почвенные сита с диаметром ячеек 0,5 см.

Колбы конические с притертыми пробками на 700 мл.

Воронки для фильтрования диаметром 10 см.

Аппарат для встряхивания.

Прибор для отгонки растворителя.

Баня водяная.

Камера для хроматографирования.

Микропипетки для нанесения стандартных растворов.

Пипетки или шприцы для нанесения проб.

Груши лабораторные для пипеток.

Пульверизатор стеклянный.

Ртутно-кварцевая лампа.

Пластинки для хроматографии 9 х 12 см. Стеклянные пластинки обрабатывают хромовой смесью, тщательно промывают водопроводной и дистиллированной водой, высушивают, протирают этиловым спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Для приготовления 40 пластинок 50 г просеянной окиси алюминия смешивают в фарфоровой ступке с 50 г силикагеля и 5 г сернокислого кальция (медицинского гипса). Смесь переносят в колбу, прибавляют 75 мл дистиллированной воды и встряхивают до образования однородной массы. 5 г сорбционной массы наливают на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат при комнатной температуре.

 

Реактивы и растворы

 

1. Хлороформ, ч.д.а.

2. Ацетон, ч.д.а.

3. Н-гексан, ч.д.а.

4. Натрий сернокислый безводный, х.ч.

5. Силикагель для хроматографии.

6. Окись алюминия (для хроматографии), просеивают через сито 100 меш (размер отверстий 0,147 мм).

    7.  Кальций  сернокислый  (CaSO  x H O),  ч.д.а.   Просушивают

                                   4    2

6  часов  в  сушильном  шкафу,  просеивают  через сито с диаметром

отверстий в 100 меш. Хранят в склянке с притертой пробкой.

8. Спирт этиловый.

9. Проявляющий реактив. 1,5 г азотнокислого серебра растворяют в 30 мл дистиллированной воды, доводят объем до 100 мл ацетоном и добавляют 3 - 4 капли 25% раствора аммиака. Готовят в день употребления. На пластинку 9 х 12 см расходуется 8 - 10 мл раствора.

10. Стандартный раствор гардоны: 100 мг гардоны, х.ч., растворяют в 100 мл ацетона.

11. Вата гигроскопическая обезжиренная.

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из пяти проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирали лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 - 25 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоев, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленке. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Пробу упаковывают в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняют сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ. Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатывают так же, как и поверхностные пробы.

 

Ход анализа

 

При определении гардоны в почве навеску воздушно-сухой почвы (100 г), растертую в фарфоровой ступке и просеянную через почвенное сито 0,5 мм, помещают в коническую колбу на 700 мл, заливают до покрытия н-гексаном и встряхивают на шуттель-аппарате в течение 1 часа. Экстракт фильтруют через слой безводного сернокислого натрия для обезвоживания н-гексаном в специальную колбу для выпаривания. Затем пробу почвы дважды промывают н-гексаном и экстракты также фильтруют через слой безводного сернокислого натрия в колбу для выпаривания. Отгонку растворителя производят на водяной бане до остаточного объема экстракта 0,3 - 0,5 мл. Экстракт количественно переносят на пластинку тонкослойной хроматографии. Одновременно на пластинку наносят стандартные растворы гардоны. Пластинку помещают в хроматографическую камеру. После окончания разгонки и высушивания пластинки ее опрыскивают проявляющим раствором и облучают ультрафиолетовым светом до четкого проявления пятен стандарта (10 - 30 мин.). Идентификация гардоны проводится по величине его Rf, которая равна 0,25.

Количественное определение с достаточной степенью точности можно проводить лишь до 10 мкг в пробе. При большем содержании препарата в пробе следует использовать пропорциональную часть исследуемого экстракта.

 

Построение калибровочного графика

 

На пластинку для хроматографирования наносят стандартный раствор гардоны в интервале концентраций от 1 до 10 мкг. Пластинки хроматографируют и обрабатывают так же, как и исследуемые пробы. Определяют площади пятен и по полученным данным строят калибровочный график.

 

Расчет анализа

 

Измеряют площадь пятна пробы на пластинке для хроматографии и по калибровочному графику определяют количество гардоны в пробе. Концентрацию гардоны в почве рассчитывают по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация гардоны в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на 1 кг почвы.

 

6. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАНВЕЛ-Д В ПОЧВЕ

МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Принцип и характеристика метода

 

Метод основан на экстракции пестицида из пробы почвы соответствующим растворителем, его концентрировании и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля. Подвижным растворителем служит смесь бензол - н-гексан - ледяная уксусная кислота в соотношении 5:10:3. Место локализации препарата обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением. Количественное определение проводится путем измерения площадей пятен проб и стандартных растворов. Метод позволяет определить 10 мкг банвел-Д в пробе почвы. Полнота определения 85 - 97%. Метод специфичен в присутствии хлорорганических пестицидов.

 

Аппаратура и посуда

 

Колбы с притертыми пробками на 500 мл.

Воронки (9 - 12 см).

Фильтры бумажные 15 см (красная лента).

Пульверизатор стеклянный для опрыскивания пластинок.

Камера для хроматографирования.

Пипетки на 1, 2, 5, 10 мл.

Микропипетки для нанесения проб и стандартных растворов.

Цилиндры мерные на 100 и 250 мл.

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-4.

Аппарат для встряхивания.

Центрифуга.

    Пластинки  для хроматографии.  Стеклянную  пластинку  размером

9 х 12  см    тщательно    промывают   содой,   хромовой   смесью,

дистиллированной водой  и  высушивают. Протирают  этиловым спиртом

или   петролейным   эфиром    и  покрывают   сорбционной   массой.

Сорбционную   массу   из   силикагеля  готовят  в соотношении 15 г

силикагеля    марки    КСК-2,5 мю,    1,5  г    CaSO   и    51  мл

                                                    4

дистиллированной   воды,   смешивают  в  фарфоровой   ступке   для

образования однородной  массы.  10  г сорбционной  массы  наливают

на  пластинку  и, покачивая, равномерно распределяют  ее  по  всей

поверхности.  Просушенные  при  комнатной температуре (18 - 20 °С)

пластинки   выдерживают   в   сушильном  шкафу  в  течение  1 часа

при t° 105 - 110 °С.

 

Реактивы и растворы

 

1. Метанол, ч.

2. Силикагель марки КСК-2,5 мю.

3. Уксусная кислота, х.ч., ледяная.

4. Бензол (перегнанный).

5. Н-гексан, ч.д.а.

6. Соляная кислота, ч., концентрированная, уд. вес 1,19.

7. Ацетон, ч.

8. Серебро азотнокислое, ч.д.а.

9. Серная кислота, ч., концентрированная, уд. вес. 1,84.

10. Аммиак водный 25%.

11. Кали едкое, ч.д.а., 0,01 н раствор.

12. Этиловый эфир, медицинский.

    13. Проявляющий реактив: 0,23 г AgNO  растворяют в 1,2 мл H O,

                                        3                      2

прибавляют  0,6  мл  аммиака  и  доводят  объем  раствора до 25 мл

ацетоном.

14. Стандартный раствор банвел-Д. 25 мг банвел-Д растворяют в 25 мл ацетона.

 

Отбор проб

 

С выбранного участка отбирают смешанный образец почвы, состоящий из пяти проб, взятых по методу конверта или по диагонали. Пробы отбирают лопатой или буром на глубину пахотного слоя (20 см). Почву отрезают лопатой отвесно в виде прямоугольной пластины. Следят за тем, чтобы в каждый образец попало примерно такое количество почвы верхнего и нижнего слоев, которое пропорционально их мощности. Взятый образец тщательно перемешивают на листе фанеры или на куске брезента, полиэтиленовой пленки. Затем для составления смешанной пробы из него отбирают какой-нибудь меркой (например, банка, стакан) небольшой объем почвы и высыпают в чистый мешочек. Из всех отдельных образцов в смешанную среднюю пробу должно попасть приблизительно одинаковое количество почвы. Все пять проб ссыпают вместе, освобождают от камней, корней и других включений и тщательно перемешивают. После перемешивания из средней массы почвы методом квартования отбирают 1,0 - 1,5 кг почвы. Проба упаковывается в хлопчатобумажный или полиэтиленовый мешочек, заполняется сопроводительный талон, вместе с которым проба отсылается в лабораторию на анализ.

Для изучения распределения пестицида по профилю почвы пробы отбирают из почвенных разрезов, сделанных до глубины 1 м через каждые 10 см или по слоям 0 - 25 и 75 - 100 см. Отобранные по слоям пробы почвы обрабатываются так же, как и поверхностные пробы.

 

Ход анализа

 

А. Почва легкого механического состава с низким содержанием гумуса.

50 г тщательно измельченной воздушно-сухой почвы заливают 150 мл метанола, добавляют 1,5 мл концентрированной HCl и встряхивают в течение 3 часов на аппарате для встряхивания. Затем почву фильтруют в выпарительную чашку, промывая несколько раз метанолом, и выпаривают до объема 0,5 - 1 мл. При помощи микропипетки или шприца наносят исследуемую пробу на хроматографическую пластинку на расстоянии 1,5 см от нижнего края так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см, и производят хроматографирование. Для этого пластинку на 0,5 см погружают в растворитель, налитый в камеру для хроматографирования. Подвижный растворитель - смесь перегнанного бензола, очищенного н-гексана и ледяной уксусной кислоты в соотношении 5:10:3.

После того как подвижный растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе 30 мин. для испарения растворителя и опрыскивают раствором азотнокислого серебра. Пластинку снова сушат и облучают УФ светом в течение 10 мин. При наличии гербицида на пластинке проявляются пятна черного цвета. Величина Rf банвел-Д на силикагеле равна 0,7.

Б. Почва тяжелого механического состава с высоким содержанием гумуса.

    Из  50  г тщательно измельченной воздушно-сухой почвы банвел-Д

экстрагируют  150  мл 0,01 н  раствора  KOH  в течение часа. После

отделения  осадка  к фильтрату прибавляют 1 - 1,5 мл H SO , 150 мл

                                                      2  4

серного  эфира и встряхивают в аппарате для встряхивания в течение

30  мин.  Смесь центрифугируют в течение 5 мин. при 1500 об./мин.,

отбирают  100  мл  прозрачного  эфирного  экстракта и упаривают до

объема 0,5 - 1,0 мл. Хроматографирование производят описанным выше

способом.

 

Построение калибровочного графика

 

На пластинку для хроматографирования наносят стандартный раствор банвел-Д (1 мг/мл) в объеме 0,01, 0,15, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 мл, что соответствует 10, 15, 20, 30, 40, 50 мкг препарата. Пластинки хроматографируют и обрабатывают так же, как и исследуемые пробы. Определяют площади пятен и по полученным данным строят калибровочный график. Он сохраняет прямолинейность в интервале концентраций от 10 до 50 мкг банвел-Д в пробе.

 

Расчет анализа

 

Измеряют площадь пятна пробы на пластинке для хроматографии и по калибровочному графику определяют количество банвел-Д в пробе. Концентрацию банвел-Д в почве рассчитывают по формуле:

 

                              а

                          С = - х 1000,

                              в

 

где:

С - концентрация банвел-Д в почве, мг/кг;

а - количество препарата в пробе почвы, определенное по калибровочному графику, мкг;

в - масса почвы, взятой для анализа, г;

1000 - коэффициент для пересчета на 1 кг почвы.

 

7. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЫШЬЯКА В ПОЧВЕ

 

Принцип и характеристика метода

 

    Метод  Гутцайта состоит в восстановлении соединений мышьяка до

мышьяковистого  водорода,  который  окрашивает бумагу, пропитанную

спиртовым   раствором  бромида  ртути  или  сулемы  в  желтый  или

коричневый  цвет,  причем  интенсивность  окраски  пропорциональна

количеству    мышьяковистого    водорода.   Соединения,   мешающие

определению  мышьяка:  соли  двух-  и трехвалентного железа, меди,

ртути,  сурьмы,  сероводород  и  др.  Влияние As(HgBr)  на реакцию

                                                      3

восстановления H AsO  в AsH  почти полностью устраняется введением

                3   4      3

в   реакционную   смесь  раствора  хлорида  двухвалентного  олова.

Конечное   соединение   мышьяка   As(HgBr) ,   полученное  методом

                                          3

Гутцайта     отличие   от   аналогичного   соединения   сурьмы),

не растворимо в 80% спирте, что позволяет определить мышьяк данным

методом   в   присутствии  сурьмы.  Мешающий  определению  мышьяка

сероводород    улавливается    ватой,    пропитанной     раствором

уксуснокислого  свинца.  Чувствительность  метода  Гутцайта  равна

0,001  мг  мышьяка.  Как правило, этим методом определяют мышьяк в

концентрациях 0,001 - 0,01 мг.

 

Аппаратура и посуда

 

Приборы для выделения мышьяка:

Аппарат представляет собой колбу объемом около 50 мл с вертикальной насадкой. Насадка состоит из хорошо пришлифованной к колбе нижней стеклянной трубки длиной 50 - 70 мм с диаметром просвета в 6 - 7 мм и верхней стеклянной трубки длиной 30 - 40 мм с диаметром просвета в 2 - 2,5 мм, хорошо пришлифованной к верхнему концу нижней трубки. Для поглощения (могущего образоваться) сероводорода в нижнюю трубку помещают разрыхленный комочек ваты, предварительно смоченный раствором уксуснокислого свинца и отжатый затем между листами фильтровальной бумаги.

Для фиксации мышьяка отверстие верхней трубки насадки покрывают диском реактивной фильтровальной бумаги и закрепляют его резиновым кольцом.

Одновременно с определением мышьяка готовят эталоны, имея около 12 (минимум 6) вышеописанных приборов.

Колбы Къельдаля емкостью 250 и 500 мл.

Колбы мерные емкостью 50 мл.

Сетки асбестовые.

Длинные стеклянные трубки, воронки.

Штативы железные.

Стаканчики для взвешивания.

Электроплитки (или газовая горелка).

 

Реактивы и растворы

 

1. Гидразин сернокислый.

2. Кислота азотная (уд. вес 1,4), х.ч., концентрированная и 10% раствор.

3. Кислота серная (уд. вес 1,835), х.ч., концентрированная и разбавленная 1:4 и 1:8 (по объему).

4. Стандартные растворы арсенита натрия: растворяют 1,32 г трехокиси мышьяка в 20 мл 2% раствора едкого натрия и доводят объем дистиллированной водой до 1 литра. В 1 мл раствора содержится 1 мг мышьяка (раствор А).

Для приготовления рабочего раствора основной стандартный раствор (А) разводят до 100 раз, для чего 10 мл стандартного раствора вносят в мерную колбу и доводят дистиллированной водой объем до 1 литра.

В 1 мл рабочего раствора (Б) содержится 0,01 мг мышьяка.

Разведением рабочего раствора (Б) в 10 раз получают раствор (В), в 1 мл которого содержится 0,001 мг мышьяка.

5. Натрий едкий, х.ч.

6. Олово хлористое в кристаллах, х.ч.

7. Парафин, 5% раствор в петролейном эфире.

8. 5% спиртовый раствор ртути бромной или сулемы.

9. 4% раствор уксуснокислого свинца в двухпроцентной уксусной кислоте: растворяют 4 г уксуснокислого свинца в 96 мл 2% уксусной кислоты.

10. Реактивная бумага: беззольную фильтровальную бумагу просушивают при 105 °С в течение часа, охлаждают в эксикаторе и погружают на 40 мин. в 5% спиртовый раствор бромида ртути. Пропитанную реактивом бумагу извлекают пинцетом и сушат на воздухе. Вырезают диски диаметром 15 мм, которые хранят в банке из темного стекла.

Перед началом испытания проводят контрольный опыт на чистоту реактивов.

Применяемые реактивы и материалы не должны содержать мышьяка.

 

Отбор проб

 

Отбор проб почвы производится буром Некрасова на разных глубинах в зависимости от поставленной цели (определение степени загрязнения поверхностного слоя, миграции химического вещества по профилю почвы и др.). Пробы почвы отбираются в пяти точках по типу "конверта". Подготовка проб почвы к анализу осуществляется общепринятыми методами.

 

Ход анализа

 

Навеску продукта помещают в колбу Къельдаля на 250 - 500 мл, прибавляют 25 мл 10% азотной кислоты, перемешивают и оставляют на 10 минут в покое. Затем в колбу с исследуемым продуктом и азотной кислотой прибавляют 10 мл крепкой серной кислоты, перемешав, помещают колбу на сетку, укрепляют лапкой к штативу и устанавливают носик капельной воронки с крепкой азотной кислотой над центром колбы, открывают кран у воронки, чтобы в минуту вытекало 15 - 20 капель кислоты, и нагревают содержимое колбы до кипения.

Во время сжигания колба должна быть наполнена бурыми парами окислов азота. Если жидкость в колбе начнет темнеть, следует увеличить приток в колбу азотной кислоты до 30 - 35 капель в минуту; когда жидкость в колбе станет бурой или бесцветной, приток азотной кислоты уменьшают до 15 - 20 капель в минуту.

Через 20 - 30 минут кипения, когда закончится стадия пенообразования, вынимают из-под колбы асбестовый лист и продолжают нагревание колбы на открытом огне так, чтобы он охватывал покрытое жидкостью дно колбы и не касался сухих ее стенок (чтобы колба не лопнула).

Когда жидкость в колбе обесцветится, прекращают прибавление в колбу азотной кислоты и кипятят жидкость в ней до белых паров серной кислоты. После этого кипятят еще 10 минут. Если в течение этого времени жидкость остается бесцветной, считают минерализацию органического вещества законченной. Если начинается потемнение жидкости, то добавляют в нее из воронки по каплям азотную кислоту и продолжают минерализацию, как указано выше.

Бесцветную или слабо-желтую жидкость в колбе Къельдаля охлаждают, разбавляют равным количеством дистиллированной воды и кипятят до появления белых паров серной кислоты, после чего к охлажденной жидкости добавляют 0,2 г гидразина сернокислого через длинную сухую трубку и воронку, наблюдая при этом, чтобы гидразин сернокислый не попал на стенки колбы. Затем содержимое колбы нагревают до кипения и кипятят 10 минут. По охлаждении жидкость из колбы Къельдаля количественно переносят в мерную колбу на 50 мл, ополаскивают колбу дистиллированной водой в ту же мерную колбу, охлаждают содержимое до комнатной температуры, доводят объем жидкости в колбе дистиллированной водой до метки, закрывают и хорошо перемешивают.

 

Выделение мышьяка

 

25 мл исследуемого раствора, полученного после разрушения органического вещества, переносят в колбу аппарата N 1. В колбы аппаратов N 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 вносят соответственно 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0; 10,0 мл типового раствора мышьяка (1 мл которого равен 0,001 мг As) и затем в каждую колбу добавляют разведенную (1:4) серную кислоту в таком количестве, чтобы общее количество жидкости во всех колбах было равно 25 мл. Далее в каждую из колб добавляют 0,2 г хлористого олова в кристаллах, 2 г цинка и тотчас же закрывают колбы насадками, содержащими бромно-ртутные кружки, и помещают колбы в темное место (под вытяжкой).

После растворения цинка (обычно 1/2 - 2 часа) снимают с трубок кружки бромно-ртутной бумаги, отмечают на них номера колб, фиксируют окраски, смачивая погружением в 5% раствор парафина в петролейном эфире, отжимают между листками фильтровальной бумаги и высушивают на воздухе (в темном месте).

В случае, если окраска на кружках бромно-ртутной бумаги получается расплывчатая, одинаковая по всей окрашенной поверхности и трудно сравнимая (зависит от качества цинка), опыт повторяют с частью оставшегося исследуемого раствора, разведенного равным количеством воды, т.е. проводят выделение мышьяка из разбавленного сернокислого раствора (1:8).

 

Построение шкалы (колориметрирование)

 

Окрашенный кружок бромно-ртутной бумаги из исследуемого раствора сравнивают с окраской кружков, полученных из раствора с известным количеством мышьяка. Наиболее легко колориметрируются окраски с содержанием мышьяка не более 0,01 мг; большие количества мышьяка затрудняют колориметрирование и результаты получаются менее точные.

Окрашенные кружки бромно-ртутной бумаги, полученные из известных количеств мышьяка, заключают между двумя стеклянными пластинками, края которых заклеивают двойным слоем бумаги. Полученную шкалу хранят в темном месте и пользуются ею для ориентировочного определения мышьяка в части исследуемого раствора. Для окончательного количественного определения мышьяка проводят выделение мышьяка из исследуемого и типового раствора одновременно, чтобы сохранить одинаковые условия опыта.

 

Расчет анализа

 

Вычисление содержания мышьяка (X) в мг на 1 кг почвы производят по следующей формуле:

 

                            G х 50 х 1000

                        X = -------------,

                               V х G

                                    2

 

    где:

    G - содержание  мышьяка  в  миллиграммах в  типовом  растворе,

дающее  окраску  кружка,  сходную с окраской кружка из испытуемого

раствора;

    V - количество  испытуемого  раствора,  взятое  для  выделения

мышьяка, в мл;

    G  - количество вещества, взятое для минерализации, в г;

     2

50 и 1000 - коэффициенты для пересчета на 1 кг почвы.

 

8. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОРМАЛЬДЕГИДА В ПОЧВЕ

 

Колориметрический метод

 

Принцип и характеристика метода

 

Формальдегид извлекается из почвы перегонкой с водяным паром в сильнокислой среде и определяется при содержании менее 10 мг/л в отгоне колориметрированием по цветной реакции с хромотроповой кислотой. Чувствительность метода составляет 0,005/100 г почвы. Определению мешают диметилдиоксан и уротропин, так как в процессе загрязнения растворов в сильнокислой среде происходит их гидролиз, приводящий к образованию формальдегида. Поэтому данный метод позволяет определить лишь сумму свободного и связанного формальдегида. При отгоне из почвы, кроме формальдегида, будут извлекаться и другие альдегиды, из которых реагирует с хромотроповой кислотой только ацетальдегид в концентрациях порядка граммов в 1 л, остальные альдегиды определению не мешают. Определению не мешают также глиоксаль, уксусная кислота и щавелевая кислота, ацетон и глицерин.

 

Аппаратура и посуда

 

1. Перегонный аппарат состоит из колбы для перегонки емкостью 500 мл, насадки с капельной воронкой и прямого холодильника; все соединения на шлифах.

2. Пробирки емкостью 50 мл с меткой - 20 мл.

3. Водяная баня.

4. Фотометр с зеленым светофильтром (лямбда = 570 мм).

5. Кюветы с толщиной оптического слоя 5 см.

 

Реактивы и растворы

 

1. Серная кислота, ч.д.а., концентрированная, уд. вес 1,84.

2. Натриевая соль хромотроповой кислоты, 2% раствор. Растворяют 1 г натриевой соли хромотроповой кислоты, ч.д.а., в дистиллированной воде, фильтруют через небольшой складчатый фильтр и фильтрат доводят дистиллированной водой до 50 мл. Применяют всегда свежеприготовленный раствор.

3. Формальдегид, стандартные растворы. Основной раствор с содержанием 0,020 мг/мл HCHO, рабочий раствор с содержанием 0,001 мг/мл HCHO.

 

Отбор проб

 

Пробы почвы отбираются послойно на глубину 0 - 20 см, 20 - 40 см, 40 - 60 см с помощью ручного почвенного бура и помещаются в склянки с пришлифованными крышками. Допускается хранение проб не более суток в холодильнике при температуре от 0 °С до +5 °С, но лучше приступать к анализу немедленно.

 

Ход анализа

 

100 г свежей почвы, из которой предварительно удалены корешки и возможные примеси, помещают в колбу емкостью 500 мл, приливают 300 - 350 мл дистиллированной воды. Колбу помещают в колбонагреватель, присоединяют холодильник и проводят отгонку. Одновременно проводят определение содержания влаги в почве. Содержимое колбы необходимо периодически перемешивать, чтобы почва в колбе не припекалась. Когда в приемник отгонится 130 - 135 мл дистиллята, перегонную колбу охлаждают, добавляют еще 100 мл дистиллированной воды и продолжают перегонку до тех пор, пока объем дистиллята не составит около 230 мл. Дистиллят переносят в мерную колбу на 250 мл и разбавляют водой до метки.

В термостойкие пробирки наливают 5 мл дистиллята, 0,5 мл 2% раствора натриевой соли хромотроповой кислоты, 5 мл концентрированной серной кислоты и все это перемешивают. Пробирки помещают в кипящую водяную баню на 30 мин. Затем содержимое пробирок охлаждают и разбавляют водой до 20 мл. После перемешивания раствор колориметрируют на ФЭК с зеленым светофильтром в кюветах с толщиной оптического слоя 5 см.

 

Построение калибровочного графика

 

В ряд пробирок набирают по 5 мл образцовых растворов с концентрацией 0; 0,0125; 0,025; 0,050; 0,100; 0,150; 0,200; 0,250 мг формальдегида в 250 мл. Для этого в мерные колбы на 100 мл наливают 5, 10, 20, 40, 60, 80, 100 мл рабочего стандартного раствора (0,001 мг/мл) и разбавляют отгоном из контрольной пробы до метки. Далее поступают, как и при анализе пробы. По показаниям ФЭКа строят калибровочную кривую зависимости светопоглощения от концентрации формальдегида.

 

Расчет анализа

 

Содержание формальдегида X в мг/100 г почвы вычисляют по формуле:

 

                               a х 100

                           X = -------,

                                  н

 

где:

а - концентрация формальдегида, найденная по калибровочному графику;

н - навеска почвы, взятая для определения в г в пересчете на абсолютно сухую почву;

100 - коэффициент пересчета на 100 г почвы.

 

Объемный метод

 

Принцип и характеристика метода

 

Объемный метод определения формальдегида в почве основан на взаимодействии карбонильных соединений (альдегидов и кетонов) с солянокислым гидроксиламином. При этом образуется оксим и выделяется соляная кислота в количестве, эквивалентном взятому альдегиду. Реакция для формальдегида протекает по уравнению:

 

          H                        H

           \                        \

            C = O + NH OH х HCl ->   C = NOH + H O + HCl.

           /          2             /           2

          H                        H

 

Образующаяся соляная кислота определяется титрованием щелочью в присутствии смешанного индикатора. Чувствительность метода 5 мг/100 г почвы. Определению не мешают другие альдегиды, фенол и метиловый спирт.

 

Аппаратура и посуда

 

Колба перегонная емкостью 0,5 л со шлифом.

Холодильник Либиха со шлифом.

Насадка к колбе с двумя шлифами.

Коническая колба емкостью 250 мл для приема отгонной жидкости.

Колбонагреватель или электрическая плитка с асбестом.

Бюретка для титрования на 50 мл.

 

Реактивы и растворы

 

1. Солянокислый гидроксиламин 1% раствор.

2. Едкий натр, ч.д.а., 0,1 N и 0,01 N растворы.

3. Смешанный индикатор (метилоранж + метиленовая синь 1:1).

Отбор проб производится так же, как и для определения формальдегида колориметрическим методом.

 

Ход анализа

 

Предварительная подготовка проб для анализа заключается в отгоне формальдегида в сильнокислой среде по методике, аналогичной с колориметрическим методом. В коническую колбу на 250 мл помещают 50 мл отгона, прибавляют 6 - 8 капель смешанного индикатора и нейтрализуют 0,1 N раствором NaOH до зеленого цвета. Затем приливают 10 мл 1% гидроксиламина и оставляют стоять 30 минут при комнатной температуре. Раствор при этом окрашивается в розовый цвет вследствие образования свободной кислоты. Одновременно проводится холостой опыт с отгоном из контрольной пробы. Через 30 мин. испытуемую и контрольную пробы титруют 0,01 N раствором NaOH до перехода розовой окраски в зеленую.

 

Расчет анализа

 

                      (а - в) х 0,01 х 30 х 100

                  Х = -------------------------,

                                 н

 

где:

X - содержание формальдегида, мг/100 г почвы;

а - мл 0,01 н р-ра NaOH, пошедшего на титрование испытуемой пробы;

в - мл 0,01 н р-ра NaOH, пошедшего на титрование контрольной пробы;

0,01 - нормальность NaOH;

30 - коэффициент для пересчета с мг-экв на мг для формальдегида;

100 - коэффициент для пересчета на 100 г почвы;

н - навеска абсолютно сухой почвы, взятая на определение, г.

 

 

 

 

 

Приложение N 2

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИАЗИНОНА (БАЗУДИНА)

В ПОЧВЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

 

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания остаточных количеств диазинона в почве при санитарном контроле.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Диазинон (базудин).

0,0-диэтил-0-(2-изопропил-4-метилпиримидил-6-)-тиофосфат.

    В чистом виде - бесцветное масло с температурой кипения  89 °С

при  0,2  мм рт. ст. Хорошо  растворим  в большинстве органических

растворителей.  Молекулярная   масса  -  303,97.  Применяется  как

почвенный инсектицид.

    ЛД   для теплокровных - 76 - 320 мг/кг.

      50

 

2. Методика определения диазинона в почве

 

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении диазинона из почвы смесью изопропиловый спирт : бензол (1:1), очистке экстракта на колонке с окисью алюминия (нейтральной) и последующем определении газожидкостной хроматографии с термоионным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Нижний предел определения 0,02 мг/кг. Обнаружение 70 - 95%.

2.1.3. Избирательность метода.

Метафос, метилнитрофос, карбофос, сайфос, трихлорметафос-3, тролен, хлорофос, гардона, фталофос и фозалон определению не мешают.

2.2. Реактивы и растворы.

Растворители: бензол, гексан, изопропиловый спирт, х.ч., свежеперегнанные.

NaCl, х.ч.

    Na SO , х.ч., безводный и 1-процентный водный раствор.

      2  4

    Al O , нейтральная, II степени активности по Брокману.

      2 3

Хроматон-N-AW-DMCS (0,16 - 0,2 мм) с 5% SE-30.

2.3. Приборы и посуда.

Хроматограф Цвет-106 или аналогичный прибор с ТИД.

Стеклянная колонка для хроматографа длиной 1 м, внутренним диаметром 3,5 мм, заполненная хроматоном с 5% SE-30 или аналогичным носителем.

Хроматографическая колонка с краном, длиной 10 см, внутренним диаметром 7 мм.

Механический встряхиватель.

Ротационный вакуумный испаритель.

Водоструйный насос.

Делительные воронки емкостью 500 мл.

Мерные колбы емкостью 100 мл.

Колбы конические со шлифами на 100 мл.

Колбы круглодонные со шлифами на 50 мл.

Пипетки емкостью 2, 5 и 10 мл.

Микрошприцы на 10 мл.

2.4. Проведение определения. Экстракция.

    Навеску  почвы  10  г тщательно растирают в фарфоровой ступке,

помещают  в  плоскодонную  колбу  и заливают 50 мл смеси бензола с

изопропиловым  спиртом  (1:1). Проводят экстракцию на механическом

встряхивателе  в  течение 30 мин. Экстракт переносят в делительную

воронку   через   бумажный  фильтр,  а  почву  заливают  таким  же

количеством  растворителя  и повторяют экстракцию. К объединенному

экстракту  в  делительную  воронку  приливают 200 мл 1-процентного

водного  раствора  Na SO   и  осторожно   переворачивают  воронку,

                     2  4

предварительно закрыв ее пробкой.

    Дают  слоям  разделиться,  нижний  слой  отбрасывают.  Верхний

органический  слой сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют

в  круглодонную  колбу  и  растворитель  удаляют  досуха с помощью

ротационного вакуумного испарителя. Сухой остаток растворяют в 2 -

3  мл  гексана  и  экстракт  очищают на колонке с окисью алюминия.

Предварительно  в  колонку  помещают  ватный тампон и при открытом

кране переносят в колонку смесь 3 г окиси алюминия в 6 мл гексана.

Избыток растворителя сливают. Когда уровень растворителя достигнет

1  мм  над  слоем  сорбента, закрывают кран колонки. Количественно

переносят   в   колонку   подготовленный   для  очистки  экстракт,

подсоединяют  вакуум  и  открывают  кран колонки. Дают возможность

экстракту  полностью  впитаться  в  сорбент.  Элюируют  диазинон с

колонки  20  мл  бензола  при  слабом  разряжении  со  скоростью 1

кап./сек.  Элюат  сушат над  безводным  Na SO .  Затем фильтруют в

                                          2  4

грушевидную колбу и отгоняют растворитель досуха.

К сухому остатку пипеткой приливают 2 мл гексана. В хроматограф вводят 2 - 3 мкл полученного раствора.

2.5. Условия.

2.5.1. Хроматографирование.

Хроматограф Цвет-106 с ТИД.

Скорость протяжки ленты самописца 1 см/мин.

Стеклянная колонка длиной 1 м и внутренним диаметром 3,5 мм, заполненная хроматоном N-AW-DMCS (0,16 - 0,2 мм) с 5% SE-30.

Температура:

колонки - 190 °С,

испарителя - 210 °С.

Скорости:

азота - 85 мл/мин.,

водорода - 15 - 17 мл/мин.,

воздуха - 150 - 180 мл/мин.

Время удерживания диазинона в этих условиях 2 мин.

В хроматограф вводят 2 - 3 мкл рабочего раствора. Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,2 - 2,0 нг.

Количественное определение проводят методом соотношения со стандартами, по высоте пиков.

Содержание диазинона в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

 

                         Н   х С   х У

                          рп    ст

                     С = ------------- мг/кг,

                         Н   х У  х А

                          ст    а

 

    где:

    Н   - высота пика анализируемой пробы в мм;

     рп

    Н   - высота пика стандарта в мм;

     ст

    С   - содержание диазинона в стандарте в нг;

     ст

    У  -  объем  конечного раствора, из которого отбирают аликвоту

для хроматографирования, в мл (2 мл);

    У  -  объем  аликвоты,  которую  вводят  в  хроматограф, в мкл

     а

(2 - 3 мкл);

А - навеска анализируемого образца почвы в г (10 г).

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", готовят менее концентрированные растворы, добавляя в конечный объем замеренное количество дополнительного гексана.

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МЕТАФОСА В ПОЧВЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ

ХРОМАТОГРАФИЕЙ

 

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания остаточных количеств метафоса в почве при санитарном контроле.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Метафос (вофатокс, вофатокс-ОМ, дальф, диметилпаратион, метацид, метилпаратион, метил-фолидол, нитрокс, нитрокс-80, фолидол-М).

0,0-диметил-0-(4-нитрофенил)-тиофосфат.

В чистом виде - белое кристаллическое вещество с температурой плавления 35 - 36 °С. Растворимость в воде при 25 °С около 55 мг/л. Плохо растворяется в парафиновых углеводородах, хорошо - в ароматических углеводородах и большинстве органических растворителей. Препарат гидролизуется водой, кислотами и щелочами, разрушается солнечным светом.

Молекулярная масса - 263,22.

 

2. Методика определения метафоса в почве

 

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода. Метод основам на извлечении метафоса из почвы органическим растворителем, отгонке растворителя, последующем хроматографировании в тонком слое силикателя: КСК или силикагеля КСК с цинковой пылью при использовании в качестве подвижной фазы смеси гексана с ацетоном (4:1). Зоны локализации препарата определяют после обработки пластинок раствором щелочи или раствором диметиламинобензальдегида (на пластинке силикагель + цинк).

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Чувствительность метода при обработке первым реактивом 5 мкг в анализируемой пробе; вторым - 1 - 3 мкг.

Величина Rf метафоса равна 0,38 +/- 0,02.

Полнота определения - 85%.

2.2. Реактивы и растворы.

Ацетон, х.ч. или ч.д.а.

Н-гексан, х.ч.

0,25-процентный раствор - диметиламинобензальдегида в этаноле.

Хранят в темной склянке. Раствор перед обработкой пластинок смешивают в соотношении 10:1 с ледяной уксусной кислотой.

Кальций сернокислый, высушенный при 160 °С в течение 6 ч и просеянный через сито (100 меш). Хранят без доступа влаги.

4 н водный раствор натра едкого.

Натрий сернокислый безводный.

Силикагель КСК. Продажный силикагель измельчают и просеивают через сито 100 меш. Хранят без доступа влаги.

Стандартный раствор метафоса в н-гексане (100 мкг/мл).

Уксусная кислота ледяная.

Цинковая пыль.

Хлороформ, х.ч. или ч.д.а.

Спирт этиловый ректификат.

Эфир диэтиловый перегнанный.

2.3. Приборы и посуда.

Аппарат для встряхивания.

Делительные воронки емкостью 250 мл.

Капиллярные пипетки.

Колбы конические вместимостью 200 мл.

Колбы мерные.

Микропипетки.

Прибор для отгонки растворителей с набором колб.

Цилиндры мерные.

Пульверизатор.

Хроматографическая камера.

2.4. Подготовка к определению.

2.4.1. Приготовление хроматографических пластинок.

14 г силикагеля тщательно смешивают с 1,5 г сернокислого кальция. Смесь суспендируют в 40 мл дистиллированной воды и равномерно наносят на 7 - 8 пластинок 9 x 12 см (примерно 6 мл суспензии на пластинку). Для приготовления пластинок с цинковой пылью к указанному количеству силикагеля и сернокислого кальция прибавляют 1 г просеянной цинковой пыли.

Пластинки сушат на воздухе при комнатной температуре 17 - 18 часов, хранят в эксикаторе над слоем осушителя.

2.5. Проведение определения.

2.5.1. Определение методом тонкослойной хроматографии.

Экстракция. 30 г воздушно-сухой измельченной в ступке почвы заливают хлороформом и оставляют при комнатной температуре на 4 - 6 час. Экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия в колбу для отгонки растворителей. Почву вновь заливают хлороформом и экстрагируют на аппарате для встряхивания 15 мин. Экстракты объединяют и отгоняют растворитель на водяной бане до небольшого объема.

2.5.2. Хроматографирование. Содержимое колбы после отгонки растворителя при анализах капиллярной пипеткой наносят на пластинку. Стенки колбы еще 3 - 4 раза споласкивают небольшими порциями диэтилового эфира (по 0,2 мл); каждый раз наносят раствор в центр первого пятна.

Пластинку с пробами и стандартными растворами помещают в камеру для хроматографирования со смесью гексана с ацетоном (4:1). После подъема фронта растворителя на высоту 10 см хроматографирование прекращают, пластинку помещают в вытяжной шкаф на 5 - 10 мин. для удаления паров растворителей. Затем пластинку опрыскивают 4 н раствором едкого натра и выдерживают в сушильном шкафу 20 мин. при температуре 120 - 130 °С.

Метафос на пластинке проявляется в виде желтых пятен. При использовании пластинок с цинком слой обрабатывают до влажного состояния смесью диметиламинобензальдегида с ледяной уксусной кислотой и выдерживают в сушильном шкафу 5 - 7 мин. при температуре 100 - 120 °С. В этом случае зоны локализации метафоса окрашиваются в ярко-желтый цвет.

2.6. Обработка результатов анализа. Количественное определение метафоса проводят путем сравнения интенсивности окраски и размеров пятен препарата пробы и стандартов раствора.

Расчет. Содержание метафоса в пробе вычисляют по формуле:

 

                                  А

                              Х = -,

                                  Р

 

где:

Х - содержание метафоса в пробе, мг/кг;

А - количество метафоса, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;

Р - масса или объем анализируемой пробы, г.

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОГОРА В ПОЧВЕ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ

И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания рогора в почве при санитарном контроле.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Фосфамид, БИ-58, дитрам, диметоат.

0,0-диметил-S-(N-метилкарбамоилметил)-дитиофосфат.

    В  чистом  виде - белое низкоплавное кристаллическое вещество,

умеренно  растворимое в воде (2,5%), с камфарным запахом. Давление

              -4

паров - 1 х 10   мм рт. ст. при 25 °С. Легко гидролизуется водными

щелочами,  относительно  устойчив  в  слабокислой   среде,  хорошо

растворим во многих органических растворителях.

Молекулярная масса - 229,2.

Выпускается в формах 40-процентного к.э., гранулированного препарата (1,6% рогора на суперфосфате).

Применяется как системный акарицид и инсектицид.

    Высокотоксичное  вещество.  ЛД    для  различных  лабораторных

                                  50

животных - 100 - 230  мг/кг. ДОК для цитрусовых и во фруктах - 1,5

мг/кг.

 

2. Методика определения рогора в почве методами

газожидкостной хроматографии и хроматографии

в тонком слое

 

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы почвы хлороформом или водой (в зависимости от вида почвы) и последующем определении методами ТСХ и ГХ.

2.2. Метрологическая характеристика метода.

Предел определения для ТСХ - 0,1 мг/кг, для ГХ - 0,05 мг/кг.

Процент определения - 75 - 80%.

2.2.1. Реактивы и растворы.

Хлороформ мед.

Ацетон, х.ч.

Н-гексан, х.ч.

Силикагель марки КСК, предварительно очищенный от примесей.

Для этого силикагель промывают разбавленной 1:1 соляной кислотой, кислоту сливают, силикагель промывают водой, кипятят в течение 2 - 3 часов с разбавленной 1:1 азотной кислотой на песочной бане в круглодонной колбе с обратным холодильником. Обработанный таким образом силикагель промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу при температуре 130 °С в течение 4 - 6 часов, периодически помешивая. Силикагель дробят и просеивают через сито 100 меш (0,147 мм). Хранят в склянке с притертой пробкой.

Натрий сульфат, х.ч., прокаленный.

Крахмал растворимый, ч.д.а.

Бромфеноловый синий (индикатор (ТУ МГ УХЛ 271-59)).

Азотнокислое серебро, х.ч.

Уксусная кислота 10-процентная.

Проявляющий реактив: 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят до 100 мл 0,5% - 1-процентным раствором азотнокислого серебра в водном ацетоне (3 ч. ацетона, 1 ч. воды).

Носитель для колонки - хромотон - 80 - 100 меш, с нанесенной жидкой фазой SE-30 в количестве 5%.

Стандартный раствор рогора в эфире и ацетоне с содержанием препарата 1,5 и 10 мкг в 1 мл.

2.2.2. Приборы и посуда.

Пластинки для хроматографирования (стеклянные пластинки размером 9 х 12 см тщательно промывают содой, хромовой смесью, дистиллированной водой и сушат в вертикальном положении. Перед нанесением сорбционной массы их протирают спиртом).

Станок для сушки пластинок.

Колбы конические емкостью 250 - 300 мл.

Делительные воронки на 250 мл.

Прибор для отгонки растворителя.

Насос водоструйный.

Баня водяная.

Камера для хроматографирования.

Пульверизатор стеклянный.

Прибор для встряхивания.

Эксикатор.

Пипетки для нанесения проб.

Шприц медицинский или микропипетки для нанесения стандартного раствора.

Хроматограф с термоионным детектором.

    Баллон с азотом, содержащий O  не более 0,03%.

                                 2

Баллон с водородом.

Баллон с воздухом.

Колонка стеклянная диаметром 3 мм, длиной 1 - 1,5 м.

2.3. Подготовка к определению.

2.3.1. Приготовление хроматографических пластинок.

Для приготовления сорбционной массы берут 40 г силикагеля КСК, 1 г растворимого крахмала и 125 мл дистиллированной воды. Крахмал заваривают в воде и в эту массу при постоянном размешивании добавляют силикагель. Хорошо размешанную сорбционную массу наносят чайной ложкой (две ложки на пластинку), равномерно распределяя по ее поверхности. Пластинки сушат в течение 10 - 12 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторах.

2.4. Проведение определения.

2.4.1. Определение методом тонкослойной хроматографии.

Экстракция. Для анализа берут 50 г воздушно-сухой почвы, растертой в ступке. Препарат из почвы экстрагируют хлороформом трижды по 50 мл, каждый раз встряхивая колбу по 10 минут на аппарате для встряхивания и давая пробе немного отстояться. Экстракт сливают через безводный сульфат натрия в колбочку для отгонки растворителя. В случае анализа почв черноземных районов (почвы с высоким содержанием гумуса) препарат экстрагируют дистиллированной водой трижды по 50 - 70 мл, каждый раз встряхивая колбу по 10 мин. на аппарате для встряхивания и давая пробе отстояться. Водные экстракты осторожно сливают в делительную воронку и добавляют 30 - 50 мл хлороформа. Экстракцию препарата из воды хлороформом повторяют трижды по 30 - 50 мл, встряхивая в делительной воронке по 5 - 7 мин. Хлороформные экстракты сливают через сульфат натрия в колбу для отгонки растворителя. Отгонку ведут под вакуумом 10 - 15 мм рт. ст. при температуре бани не более +40 °С. Растворитель отгоняют до небольшого объема (0,1 - 0,2 мл).

2.4.2. Хроматографирование. Подготовленные экстракты количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбочку с экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят стандартные растворы (шприцом или микропипеткой), содержащие 5, 10 и 20 мкг препарата.

Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую предварительно залита смесь растворителей гексан - ацетон в соотношении 1,5:1. Край пластинки не должен быть погружен в раствор более чем на 0,5 см. После того как фронт подвижного растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. Пластинку обрабатывают проявляющим реактивом. После высушивания пластинки на воздухе ее обрабатывают 5 - 10-процентной уксусной кислотой. Зоны локализации препарата обнаруживаются в виде синих пятен на желтом фоне. Величина Rf рогора - 0,6 - 0,65, Р = 0 аналога - 0,20 - 0,25.

2.5. Обработка результатов анализа. Количественное определение производят путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы. Площадь пятен измеряют планиметром или с помощью промасленной миллиметровой бумаги.

Расчет. Содержание рогора в анализируемой пробе в мг/кг рассчитывают по формуле:

 

                                А х 2

                            Х = -----,

                                В х 1

 

где:

Х - содержание пестицида в анализируемой пробе, мг/кг;

А - содержание препарата в стандартном растворе;

1 - площадь пятна стандартного раствора в кв. мм;

2 - площадь пятна пробы в кв. мм;

В - масса анализируемой пробы в г.

2.6. Определение методом газожидкостной хроматографии.

Экстракт хлороформа упаривается до объема 0,2 - 0,3 мл на роторном испарителе, а затем досуха на воздухе. Перед хроматографированием остаток растворяется в 1 - 2 мл ацетона и аликвотная часть (3 - 5 мкл) хроматографируется.

    2.6.1.  Условия хроматографирования. Хроматограф с термоионным

                                             -10

детектором (Цвет-106, Цвет-5), шкала 2,5 х 10    А.

Скорость протяжки бумаги - 360 мм/час.

Колонка стеклянная, длиной 1 м, диаметр 3 мм.

Носитель - хромотон с 5% SE-30.

Температура колонки - 180 °С;

испарителя 210 °С.

Скорость азота - 20 - 22 мл/мин.;

водорода - 14 - 17 мл/мин.;

воздуха - 400 мл/мин.

Вводимый объем - 3,5 мкл.

Линейный диапазон детектирования - 1 - 10 нг.

При указанных выше условиях время элюирования рогора - 1,8 мин., Р = 0 аналога - 1,1 мин.

Содержание рогора в анализируемой пробе рассчитывают по общепринятым формулам.

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ФОЗАЛОНА В ПОЧВЕ

МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания остаточных количеств фозалона в почве при санитарном контроле.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Фозалон, бензофосфат, золон, РР 11074.

0,0-диэтил-s-(6-хлорбензоксазолинил-3-метил)-дитиофосфат.

    В  чистом  виде  -  кристаллическое  вещество  с  температурой

плавления  47 - 48 °С.  Нелетучий. Упругость паров при 20 °С около

нуля.  Растворимость  в воде 10 мг/л при 20 °С. Хорошо растворим в

ацетоне,  хлороформе, спиртах. Устойчив в кислой среде, в щелочной

- быстро гидролизуется. Молекулярная масса 367,82. Применяется как

акарицид контактного действия и инсектицид. ЛД   для  теплокровных

                                              50

- 135 - 390 мг/кг (сравнительно малотоксичный для теплокровных).

 

2. Методика определения фозалона в почве

 

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении фозалона из почвы смесью ацетон - вода (1:1), очистке экстракта перераспределением из ацетоно-водной среды в хлороформ и последующем определении ТСХ.

2.2. Метрологическая характеристика метода.

Нижний предел определения - 0,01 мг/кг (1 мкг в пробе).

Обнаружение - 90,0 +/- 10,6%.

2.3. Избирательность метода.

Метод селективен. Фосфамид, фенкаптон, цидиал, хлорофос, карбофос, фталофос, бромофос и др. фосфорорганические пестициды определению не мешают.

2.3.1. Реактивы и растворы.

Растворители: ацетон, гексан, диэтиловый эфир, хлороформ, четыреххлористый углерод, х.ч., свежеперегнанные.

Гипс.

Натрий азотистокислый безводный, х.ч.

Натрий едкий, х.ч.

Натрий сульфат безводный, х.ч., прокаленный.

Соляная кислота, х.ч., 20-процентный раствор.

Окись алюминия безводная, х.ч.

Сульфаниловая кислота.

Проявляющий реактив N 1 - диазотированная сульфаниловая кислота. Сульфаниловую кислоту (0,5 г) растворяют при нагревании в 90 мл дистиллированной воды и доливают 10 мл 20-процентного раствора соляной кислоты. Сульфаниловую кислоту смешивают со свежеперегнанным 0,5-процентным раствором азотистокислого натрия и 25-процентным раствором едкого натрия в равных количествах.

Проявляющий реактив N 2 - бромфеноловый синий. Смесь 10 мл 0,4-процентного раствора бромфенолового синего и 90 мл 1-процентного раствора азотнокислого серебра в 75-процентном водном ацетоне. 5-процентный раствор уксусной кислоты.

Проявляющий реактив N 3 - 0,5-процентный раствор 2,6-дибром-хлор-р-хинонимина в гексане.

2.3.2. Приборы и посуда.

Баня водяная.

Делительные воронки на 250 мл.

Камера для хроматографирования.

Микропипетки для нанесения стандартного раствора и проб.

Конические колбы на 250 мл.

Прибор для встряхивания. Станок для сушки пластинок.

Эксикатор.

Пластинки "Силуфол".

Насос водоструйный.

Хроматографические пластинки стеклянные размером 9 х 12 см, тщательно промытые содой, хромовой смесью, а затем дистиллированной водой. Пластинки сушат в вертикальном положении. Перед нанесением сорбента пластинки протирают спиртом.

2.4. Подготовка к определению.

2.4.1. Приготовление хроматографических пластинок.

Пластинки с закрепленным слоем окиси алюминия.

Для приготовления сорбционной массы 50 г окиси алюминия и 5 г гипса помещают в коническую колбу емкостью 250 мл, добавляют 75 мл дистиллированной воды, раствор тщательно перемешивают и равномерно наносят на пластинки. Данного количества достаточно для 6 - 8 пластинок при толщине слоя 0,3 - 0,5 мм. Пластинки сушат в течение 10 - 12 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторе над силикагелем.

Пластинки с закрепленным слоем двуокиси кремния.

Для приготовления сорбционной массы 12 г двуокиси кремния для люминофоров (фракция 0,08 - 0,09 мм) хорошо перемешивают с 1 г гипса, добавляют постепенно 50 мл дистиллированной воды, смесь тщательно перемешивают и сразу же наносят на 3 хроматографические пластинки. Пластинки сушат при комнатной температуре в течение 10 - 12 часов и хранят в эксикаторе.

2.5. Проведение определения.

2.5.1. Определение методом ТСХ. Экстракция.

Для анализа берут 50 - 100 г воздушно-сухой почвы, размельченной в фарфоровой ступке и пропущенной через сито (диаметр отверстий 0,5 мм). Фозалон из почвы экстрагируют 150 мл смеси ацетона с водой (1:1) при помощи механического встряхивания в течение часа. Экстракт сливают через двойной складчатый фильтр в делительную воронку. Фозалон из ацетоно-водной среды экстрагируют хлороформом трижды, порциями по 50 мл. Объединенные хлороформные экстракты сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и с помощью ротационного вакуумного испарителя отгоняют растворитель до объема 0,1 - 0,2 мл.

2.5.2. Хроматографирование. Остаток количественно наносят на хроматографическую пластинку с закрепленным слоем алюминия или двуокиси кремния для люминофоров.

Диаметр пятна не должен превышать 0,5 - 1,0 см.

На пластинку наносят 3 пятна (2 пробы и 1 стандарт или 1 проба и 2 стандарта) на расстоянии 15 - 20 мм друг от друга и от краев пластинки.

Пластинки с нанесенным раствором помещают в хроматографическую камеру; подвижный растворитель для пластинок с окисью алюминия - смесь гексана с ацетоном (1:1). После развития хроматограммы пластинку сушат в течение 5 - 10 мин. на воздухе, а затем обрабатывают проявляющим реактивом N 1. Через 1 - 2 мин. фозалон проявляется в виде красных пятен на белом фоне. Rf - 0,6 - 0,65.

Подвижный растворитель для пластинок "Силуфол" или с двуокисью кремния для люминофоров - смесь хлороформа с четыреххлористым углеродом (6:7). После развития хроматограммы и высушивания пластинку обрабатывают проявляющим реактивом N 2 с последующим снятием фона 0,5-процентным раствором уксусной кислоты. Фозалон проявляется в виде голубых пятен на лимонно-желтом фоне с Rf 0,64 - 0,68.

Минимально детектируемое количество 1 мкг в анализируемой пробе.

Хроматограмму можно также обрабатывать проявляющим реактивом N 3.

В этом случае фозалон проявляется после нагревания пластинки в течение 5 - 7 мин. при 105 - 110 °С в виде устойчивых оранжевых пятен на белом фоне.

Минимально детектируемое количество 0,5 мкг в анализируемой пробе.

2.6. Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности окраски пятен рабочей пробы и пятен серии стандартов. Содержание фозалона в исследуемой пробе вычисляют по формуле:

 

                               С

                                рн

                        С    = --- мг/кг,

                         фоз    А

 

    где:

    С   -  содержание  пестицида,  найденное  путем  сравнения  со

     рн

стандартами в анализируемой пробе, в мкг;

А - навеска исследуемой пробы почвы в г.

 

3. Газохроматографический метод. Определение ГЖХ с ТИД

 

3.1. Основные положения.

3.1.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении фозалона из почвы смесью изопропилового спирта с бензолом (1:1), очистке экстракта сублимацией в вакууме и последующем определении газожидкостной хроматографией с ТИД.

3.2. Метрологическая характеристика метода.

Нижний предел определения - 0,05 мг/кг. Обнаружение - 71 - 105%.

3.2.1. Избирательность метода.

Прочие фосфорорганические пестициды, в том числе фосфамид, метафос, метилнитрофос, трихлорметафос-3, сайфос, диазинон, гардона, фталофос и др. определению не мешают.

3.2.2. Реактивы и растворы.

Растворители: бензол, ацетон, изопропиловый спирт, гексан, х.ч., свежеперегнанные.

    Na SO , х.ч.

      2  4

    Na SO , х.ч., безводный и 1-процентный водный раствор.

      2  4

Хромотон-N-AW-DWCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30 или аналогичный носитель.

Хромосорб-W - промытый кислотой и силанизированный ДМХС (100 - 120 меш) с 5% SE-30 или аналогичный носитель.

3.2.3. Приборы и посуда.

Хроматограф Цвет-106 или аналогичный прибор, снабженный ТИД.

Стеклянная колонка длиной 1 м и внутренним диаметром 3,5 мм.

Высоковакуумный насос.

Прибор для измерения разряжения типа Мак-Леод.

Механический встряхиватель.

Ротационный вакуумный испаритель.

Прибор для сублимации в вакууме.

Делительные воронки на 500 мл.

Мерные колбы на 100 мл.

Колбы плоскодонные на 500 мл.

Колбы круглодонные на 50 мл со шлифом.

Пробирки с притертыми пробками на 10 мл.

Пипетки на 2, 5 и 10 мл.

Микрошприц на 10 мкл.

3.3. Подготовка к определению.

    Навеску  почвы  20  г тщательно растирают в фарфоровой ступке,

помещают  в  плоскодонную  колбу,  добавляют  10  мл  воды и после

увлажнения   пробы   заливают   почву   50   мл  смеси  бензола  с

изопропиловым  спиртом  (1:1). Проводят экстракцию на механическом

встряхивателе  в  течение 30 мин. Экстракт переносят в делительную

воронку   через   бумажный  фильтр,  а  почву  заливают  таким  же

количеством  растворителя  и повторяют экстракцию. К объединенному

экстракту  в  делительную  воронку  приливают 200 мл 1-процентного

раствора Na SO  и осторожно, не взбалтывая, переворачивают воронку

           2  4

несколько  раз,  предварительно  закрыв  ее  пробкой.  Дают  слоям

разделиться,   нижний   и   водный   слой   отбрасывают.   Верхний

органический   слой   сушат  над  безводным  Na SO ,  фильтруют  в

                                               2  4

круглодонную  колбу  и  растворитель удаляют досуха на ротационном

испарителе.

Сухой остаток количественно переносят гексаном в патрон сублиматора. Отгоняют растворитель на водяной бане досуха и проводят сублимацию фозалона из сухого остатка в течение 40 мин. при температуре бани 95 - 97 °С и разряжении 0,3 - 0,2 мм рт. ст. По окончании сублимации смывают фозалон с пальца сублиматора 10 мл ацетона в пробирку, отгоняют ацетон на горячей водяной бане, следы растворителя отдувают слабым током воздуха.

К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл гексана. Дальнейшее определение проводят ГЖХ или ТСХ на "Силуфоле".

В хроматограф вводят 2 мкл полученного раствора.

3.3.1. Условия хроматографирования.

Хроматограф Цвет-106 с ТИД.

Скорость протяжки ленты самописца 1 см/мин.

                                        -12

    Рабочая шкала электрометра - 20 х 10    А.

Стеклянная колонка длиной 1 м и внутренним диаметром 3,5 мм заполнена хромотоном-N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.

Температура колонки и испарителя - 240 °С.

Скорость азота - 85 мл/мин., водорода - 15 - 17 мл/мин., воздуха - 160 мл/мин.

Время удерживания фозалона в этих условиях 3 мин. 50 сек. В хроматограф вводят 2 мкл рабочего раствора.

Линейность детектирования сохраняется в пределах 1 - 20 нг. Прочие фосфорорганические пестициды определению не мешают.

Количественное определение проводят методом соотношения со стандартами по высоте пиков.

Содержание фозалона в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

 

                         Н   х С   х У

                          рп    ст

                  С    = ------------- мг/кг,

                   фоз   Н   х У  х А

                          ст    а

 

    где:

    Н   - высота пика анализируемой пробы в мм;

     рп

    Н   - высота пика стандарта в мм;

     ст

    С   - содержание фозалона в стандарте в нг;

     ст

    У  -  объем  конечного раствора, из которого отбирают аликвоту

для хроматографирования, в мл (2 мл);

    У  - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, в мкл (2 мкл);

     а

А - навеска анализируемого образца почвы в г (20 г).

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", готовят менее концентрированный раствор, добавляя в конечный объем замеренное количество дополнительного гексана.

3.3.2. Альтернативная колонка:

Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3,5 мм заполнена хромосорбом-W, промытым кислотой и силанизированным ДМХС (100 - 120 меш) с 5% Е-31.

Температура колонки и испарителя - 240 °С.

Скорость азота - 85 мл/мин.,

водорода - 15 - 17 мл/мин.,

воздуха - 160 мл/мин.

Время удерживания фозалона в этих условиях 5 мин. 45 сек.

3.3.3. Газохроматографический метод. Определение ГЖХ с ДЭЗ.

3.4. Основные положения.

3.4.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении фозалона из почвы смесью гексана с ацетоном, очистке экстракта на колонке с окисью алюминия с последующим газохроматографическим определением с ДЭЗ.

3.4.2. Метрологическая характеристика метода. Нижний предел определения - 0,04 - 0,1 мг/кг. Обнаружение - 76 - 101%.

3.4.3. Избирательность метода.

Хлорорганические пестициды, в том числе ДДТ и его метаболиты, изомеры ГХЦГ, гептахлор и др., а также фосфорорганические пестициды определению не мешают.

3.4.4. Реактивы и растворы.

    Растворители:  гексан, ацетон, бензол, х.ч., свежеперегнанные,

Na SO , х.ч., безводный и 1-процентный водный раствор.

  2  4

    Al O , нейтральная, II степени активности по Брокману.

      2 3

Хромосорб-W, промытый кислотой, силанизированный ДМХС (100 - 120 меш) с 5% SE-30 или аналогичный носитель.

Стандартные растворы фозалона в гексане с содержанием 0,2; 0,4; 0,5; 0,8; 1,0; 2,0; 5,0; 7,0 мкг/мл.

3.4.5. Приборы и посуда.

Газожидкостные хроматографы Цвет-106, Газохром 1106э, Газохром 1109 мрд или аналогичные приборы с ДЭЗ.

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3,5 мм.

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 150 см, внутренним диаметром 15 мм с краном.

Аппарат для встряхивания.

Делительные воронки на 500 мл.

Сито с размером отверстий 0,5 мм.

3.5. Подготовка к определению.

    Навеску  воздушно-сухой  почвы (10 г),  просеянной  через сито

0,5 мм,  помещают  в  коническую  колбу емкостью 250 мл, добавляют

10 мл дистиллированной  воды  и  оставляют  на 30 мин. Затем в эту

колбу   добавляют  20  мл  ацетона  и  40  мл  гексана  и  фозалон

экстрагируют,  встряхивая  на  аппарате в течение часа. Экстракцию

повторяют  с  тем  же  количеством  растворителей.   Жидкую  часть

переносят в делительную воронку  емкостью 500 мл, в эту же воронку

приливают 120 мл 1-процентного раствора Na SO   и  встряхивают   в

                                          2  4

течение 5 - 10 мин. Гексановый слой отделяют,  а  водно-ацетоновый

слой   экстрагируют  дважды   гексаном,  порциями   по    20   мл.

Объединенные  гексановые  экстракты  сушат,  фильтруя  через  слой

безводного сульфата натрия, а  затем пропускают  через  колонку  с

окисью алюминия.

Экстракцию фозалона из почв следует проводить не позднее чем через сутки после отбора пробы почвы.

Для очистки экстракта в нижнюю часть хроматографической колонки помещают тампон из обезжиренной ваты и 3 г окиси алюминия в 6 мл гексана. После того как растворитель элюирован, через колонку пропускают гексановый экстракт почвы со скоростью 55 - 65 капель/мин., используя зажим или двухходовой кран на отводе приемника. Остатки гексанового экстракта "отжимают" с помощью груши или поддавливают азотом. После этого элюируют фозалон 80 мл бензола со скоростью 105 - 115 кап./мин., остатки бензольного экстракта отжимают с помощью груши. Колонку промывают 40 мл гексана и этот элюат отбрасывают, после чего колонка готова для следующего определения.

При предлагаемом способе промывки хроматографической колонки одно и то же наполнение колонки можно использовать для 10 - 15 определений <*>.

--------------------------------

    <*>  Очистку  экстракта  на колонке с Al O  можно использовать

                                            2 3

вместо  очистки вакуумной сублимацией при определении фозалона ГЖХ

с ТИД.

 

Из гексанового или бензольного элюата удаляют с помощью ротационного вакуумного испарителя растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 2 мл гексана и вводят в хроматограф 2 - 3 мкл полученного раствора.

При соответствующих условиях хроматографирования в гексановом элюате определяют хлорорганические пестициды, в бензольном - фозалон.

3.5.1. Условия хроматографирования.

 

┌──────────────────────────────────┬─────────┬─────────┬─────────┐

              Условия             │Цвет 106 │Газохром │Газохром │

                                             1109     1106  

├──────────────────────────────────┼─────────┼─────────┼─────────┤

│Расход газа-носителя через        │70       │80       │80      

│колонку, мл/мин.                                            

│Расход газа-носителя для поддува  │120      │140      │105     

│детектора, мл/мин.                                          

│Температура, °С                                             

  детектора                       │250      │250      │250     

  испарителя                      │220      │275      │275     

  колонки                         │230      │240      │240     

│Охлаждение ввода в испаритель,    │-        │1        │1       

│кап./сек.                                                   

│Скорость протяжки ленты самописца,│10       │10       │10      

мм/мин.                                                     

│Колонка стеклянная, м х мм        │1 х 3,5  │1 х 3,5  │1 х 3,5 

│Абсолютное время удерживания, мин.│                          

  фозалон                         │2,5      │2,6      │2,8     

  хлорорганические пестициды      │0,6 - 1,5│0,7 - 1,6│0,7 - 1,8│

│Линейный диапазон детектирования, │0,4 -    │1,0 -    │0,6 -   

│нг                                │10,0     │25,0     │15,0    

└──────────────────────────────────┴─────────┴─────────┴─────────┘

 

3.5.2. Обработка результатов анализа.

Количество фозалона в инъектируемой пробе находят по градуировочному графику и содержание фозалона в анализируемом образце почвы в мг/кг вычисляют по формуле:

 

                             С х У

                      С    = ------ мг/кг,

                       фоз   У  х А

                              а

 

где:

С - количество фозалона, найденное по градуировочному графику, в нг;

У - конечный объем раствора, из которого отбирают аликвоту для хроматографирования, в мл;

    У  - объем аликвоты, вводимой в хроматограф, в мкл (2 - 3 мкл);

     а

А - навеска анализируемого образца почвы в г (10 г).

Если при введении в хроматограф получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание", готовят менее концентрированные растворы путем добавления к конечному раствору замеренного пипеткой дополнительного количества гексана.

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФТАЛОФОСА В ПОЧВЕ МЕТОДОМ

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания фталофоса в почве при санитарном контроле.

 

1. Краткая характеристика препарата

 

Фталофос (имидан, пролат, ПМП, R-1504, сафадон, фосмет) 0,0-диметил-S-фталимидометилдитиофосфат.

В чистом виде - белое кристаллическое вещество с температурой плавления 72 - 72,7°. Плохо растворим в воде (25 мг/л), хорошо - в органических растворителях. В кислой среде устойчив к гидролизу (при pH 5 - период полураспада 15 дней, при pH 7,0 - 12 часов, при pH 8,3 - 4 часа). Разрушается окислителями. Молекулярная масса - 317,32.

 

2. Методика определения фталофоса в почве

 

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы ацетоном и последующем определении методом тонкослойной хроматографии.

2.2. Метрологическая характеристика метода.

Предел определения - 1 мкг фталофоса в пробе (0,02 мг/кг).

2.3. Избирательность метода.

Хлорофос, фозалон и другие фосфорорганические пестициды определению не мешают.

2.4. Реактивы и растворы.

Силикагель ЛС 5/40 для тонкослойной хроматографии с 13% гипса (Хемапол, ЧССР).

Натрий сернокислый безводный. Просушивают в сушильном шкафу при температуре 150 °С в течение 6 часов, хранят в банке с притертой пробкой.

Н-гексан.

Ацетон, ч.д.а.

Хлороформ, х.ч.

Фталофос, х.ч.

Стандартный раствор фталофоса в этиловом эфире, содержащий 100 мкг/мл.

Проявляющий реагент 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят объем раствора до 100 мл 0,5-процентным раствором азотнокислого серебра в водном ацетоне (3 ч. ацетона, 1 ч. воды).

Проявляющий реактив хранят в посуде из темного стекла. Уксусная кислота 10% раствор.

2.5. Приборы и посуда.

Стаканы стеклянные на 100 мл.

Палочки стеклянные.

Воронки стеклянные конические.

Воронки делительные на 250 и 500 мл.

Камера для хроматографирования.

Камера для опрыскивания.

Пульверизаторы стеклянные.

Пластинки стеклянные 9 х 12 см.

Прибор для отгонки растворителей.

Пипетки капиллярные для нанесения стандартов.

2.6. Подготовка к определению.

2.6.1. Приготовление хроматографических пластинок.

Для приготовления 10 пластинок берут 15 г силикагеля указанной марки и тщательно растирают в фарфоровой ступке, добавляя постепенно 35 мл воды. Переносят в колбу и встряхивают до образования однородной массы. На пластинку, предварительно обезжиренную спиртом, наносят 5 г сорбционной массы и, покачивая, равномерно распределяют по поверхности. Сушат в течение 18 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторе над слоем осушителя.

2.7. Проведение определения.

2.7.1. Определение методом тонкослойной хроматографии.

Экстракция. 50 г воздушно-сухой почвы помещают в стеклянный стакан, предварительно слегка измельчив крупные комки в фарфоровой ступке. Слегка увлажняют водой и перемешивают стеклянной палочкой. Экстракцию проводят 4-кратно ацетоном (общий объем экстракта 100 мл) при перемешивании пробы, отстаивая каждый раз по 15 минут, экстракты объединяют в делительной воронке, сливая через слой безводного сернокислого натрия. Затем в воронку добавляют 100 мл воды и 20 мл хлороформа, насыщенного водой. Делительную воронку осторожно покачивают 10 мин., отстаивают и сливают слой хлороформа через безводный сернокислый натрий в колбу для упаривания. Повторяют экстракцию хлороформом еще дважды. Экстракт упаривают под вакуумом при температуре не выше 40 °С досуха. Остаток растворяют в диэтиловом эфире, ополаскивая колбу трижды эфиром, и наносят раствор на хроматографическую пластинку. На эту же пластинку наносят стандартные растворы фталофоса, содержащие 1,5 и 10 мкг фталофоса.

2.7.2. Хроматографирование. Пластинку с нанесенным раствором помещают в камеру для хроматографирования, в которую налит подвижный растворитель: смесь ацетона и гексана (1:2). Насыщение камеры не менее 30 минут. Погружение пластинки в растворитель должно быть не более чем на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают, хорошо просушивают на воздухе и снова помещают в ту же камеру и дают подняться фронту растворителя на 10 см. Затем пластинку подсушивают на воздухе и опрыскивают проявляющим реагентом, а через 5 мин. - раствором уксусной кислоты. Зоны локализации препарата обнаруживаются в виде ярко-синих пятен. Величина Rf фталофоса равна 0,58 +/- 0,5.

2.8. Обработка результатов анализа. Количественное определение производят путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.

Расчет. Содержание фталофоса в анализируемой пробе в мг/кг рассчитывают по формуле:

 

                              А

                          Х = - мг/кг,

                              В

 

где:

Х - содержание исследуемого препарата в пробе, мг/кг;

А - количество препарата, найденного путем визуального сравнения со стандартом, мг;

В - навеска исследуемой пробы, кг.

 

 

 

 

 

Приложение N 3

 

Прометрин - метод основан на реакции образования окрашенных комплексов при взаимодействии серосодержащих веществ с бромфеноловым синим в присутствии азотнокислого серебра. Метод заключается в том, что прометрин извлекают из исследуемой пробы органическим растворителем, экстракт очищают и затем хроматографируют в тонком слое окиси алюминия. Чувствительность метода для воды 0,05 мг/л, для почвы и растительных продуктов - 0,1 мг/кг. Авторы метода: Дроздова А.О., Закордонец В.А. Метод опубликован в журнале "Химия в сельском хозяйстве" N 6, 1969.

Хлорофос - метод определения хлорофоса в почве основан на извлечении препарата из исследуемой среды хлороформом или водой, в зависимости от типа почвы, и последующем определении методом тонкослойной хроматографии с обработкой пластинок раствором йода и проявляющим реактивом (смесь 2% водного раствора резорцина и 10% раствора карбоната натрия в соотношении 2:3). Чувствительность определения 0,03 мг/кг (3 мкг в пробе). Метод избирателен в присутствии других фосфорорганических пестицидов. Автор - Моложанова Е.Г. Методика опубликована в трудах II Всесоюзного совещания по исследованию остатков пестицидов и профилактике загрязнения ими продуктов питания, кормов и внешней среды (г. Таллин, 1971, стр. 177 - 178).

Карбофос - метод основан на извлечении карбофоса из исследуемой пробы органическим растворителем и последующем хроматографировании в тонком слое силикагеля. Пятна карбофоса обнаруживаются после опрыскивания пластинок смесью растворов азотнокислого серебра и бромфенолового синего в ацетоне с последующим обесцвечиванием фона уксусной кислотой. Чувствительность определения 2 мкг в пробе.

Авторы метода: Клисенко М.А. и Письменная М.В. Метод опубликован в книге Клисенко М.А. и др. "Химический анализ микроколичеств ядохимикатов", М., 1972, стр. 84 - 87.

Хлорамп - метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы ацетоном с добавлением 1 - 1,5 мл 0,1 Н HCl и последующем хроматографировании в тонком слое на силикагеле. Препарат обнаруживается после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением. Чувствительность метода 0,16 мг хлорампа в 1 кг почвы.

ПДК химических веществ в почве разработаны:

Бенз(а)пирен - Институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР (Перелыгин В.М., Тонкопий Н.И., Перцовская А.Ф., Кашкарова Г.П., Шестопалова Г.Е., Филимонова Е.В., Новикова Е.Э., Аргэ С.А.), Онкологический научный центр АМН СССР (Ильницкий А.П., Шабад Л.М., Соленова Л.Г., Мищенко В.С), Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Марзеева (Янышева Н.Я., Киреева И.С, Павлова Н.А.).

Свинец - Институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР (Перелыгин В.М., Григорьева Т.И., Перцовская А.Ф., Динерман А.А., Кашкарова Г.П., Павлов В.Н., Доскина Т.В., Филимонова Е.В., Новикова Е.Э.), Ростовский медицинский институт (Золотов П.А., Пруденко О.В., Ружникова Т.Н., Колесникова Т.В.).

Хром - Институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Сысина АМН СССР (Перелыгин В.М., Динерман А.А., Перцовская А.Ф., Павлов В.Н., Рождественская Н.А., Филимонова Е.В., Донерьян Л.Г., Агрэ С.А., Новикова Е.Э.).

Дилор, цинеб, гептахлор, пропанид, гордона, кельтан - Киевский медицинский институт им. акад. А.А. Богомольца (Гончарук Е.И., Прокопович А.С, Геец В.И., Шостак Л.И., Меленевская А.В., Малашевский В.В., Спасов А.С.).

Банвел-Д, прометрин, карбофос, хлорамп, ртуть - Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Марзеева (Найштейн С.Я., Чегринец Г.Я., Воронова Г.Ф., Юровская Е.М., Гордиенко Н.И., Пикула Р.Г., Безбородко М.Д., Лейбович Д.М.).

Мышьяк - Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Марзеева (Найштейн С.Я., Вашкулат Н.Г.), Государственный институт гигиены, Будапешт, ВНР (Хорват Аманда).

Хлорофос - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Спыну Е.И., Моложанова Е.Г.), Киевский научно-исследовательский институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н. Марзеева (Найштейн С.Я., Жулинская В.А., Юровская Е.М.).

Метафос, рогор, фталофос - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Клисенко М.А., Васягина Р.Д., Шмичидина А.М., Акоронко С.А., Гиренко Д.Б.).

Базудин - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Мельнер Ф.Р., Алдошина Т.В.), Всесоюзный научно-исследовательский институт химических средств защиты растений (Новикова К.Ф.).

Фозалон - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Моложанова Е.Г.), Всесоюзный научно-исследовательский институт химических средств защиты растений (Алдошина Т.В., Мельцер Ф.Р., Новикова К.Ф.), институт экспериментальной метеорологии, г. Обнинск (Бабкина Э.И., Миронюк Г.В., Сиверина А.А., Дибцова А.В.), Всесоюзный институт защиты растений, Ленинград (Иванченко В.Р.).

Рогор - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Гиренко Д.Б., Акоренко С.Л.).

Фталофос - Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (Зорьева Т.Д.).

 

 






Яндекс цитирования

© www.ussrdoc.com, 2011.